The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

Nan Zhang; Liakot A Khan; Edward Membreno; Gholamali Jafari; Siyang Yan; Hongjie Zhang; Verena Gobel

doi:10.3791/56100

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Il c. elegans intestino come un modello per intercellulare Lumen morfogenesi e biogenesi di membrana polarizzata In Vivo a livello di singola cellula: etichettatura da macchiatura dell'anticorpo, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

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The C. elegans Intestine As a Model for Intercellular Lumen Morphogenesis and In Vivo Polarized Membrane Biogenesis at the Single-cell Level: Labeling by Antibody Staining, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

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Il c. elegans intestino come un modello per intercellulare Lumen morfogenesi e biogenesi di membrana polarizzata In Vivo a livello di singola cellula: etichettatura da macchiatura dell'anticorpo, RNAi Loss-of-function Analysis and Imaging

DOI:

10.3791/56100-v

•

12:15 min

•

October 03, 2017

•

Nan Zhang², Liakot A Khan, Edward Membreno, Gholamali Jafari, Siyang Yan, Hongjie Zhang³, Verena Gobel

¹Mucosal Immunology and Biology Research Center, Developmental Biology and Genetics Core, Massachusetts General Hospital,Harvard Medical School, ²College of Life Sciences,Jilin University, ³Faculty of Health Sciences,University of Macau

Capitoli

00:05Titolo
01:24Introduction to the Accompanying Publication
02:47Nematode Fixation
04:19Nematode Antibody Staining
06:33Applying RNAi to Nematodes Using a Feeding Protocol
07:57Analyzing Phenotypes Using Fluorescence Dissecting Microscopy
08:41Analyzing Phenotypes Using Confocal Microscopy
10:14Results: Immunohistochemistry, RNAi and Microscopic Analysis of Intestinal Apical membrane and Lumen Morphogenesis
11:45Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Il trasparente c. elegans intestino può servire come una"nel vivo del tessuto camera" per lo studio della biogenesi di membrana e lume di apicobasal a livello di singola cellula e subcellulare durante tubulogenesis multicellulari. Questo protocollo viene descritto come combinare etichettatura standard, perdita di funzione genetica/RNAi e approcci al microscopio dissezionare questi processi a livello molecolare.

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