Denna video ger en detaljerad metodik för att odla bröstcancerceller i en 3D källarmembranproteinmatris, vilket exemplifierar potentialen hos 3D-kulturen vid bedömning av cellinvasion i den omgivande miljön.
Protocol
1. Tredimensionell kultur av bröstcancerceller i källarmembranmatris (inbäddningstekniken) Hantering av Matrigel källarmembranmatris: Tina på is över natten vid 4 °C. Källarmembranmatrisen är flytande vid låg temperatur men stelnar vid rumstemperatur. Håll källarmembranmatrisen på is( figurerna 1A-B). Täck den konfokala glasbottnen nr 1 med 50 μl källarmembranmatris genom att sprida matrisen med hjälp av spetsen på en P-200 Pipetman i ett spiralmön…
Representative Results
Figur 1. Tredimensionell kultur av MDA-MB-231 bröstcancerceller i källaren membran matris (inbäddningstekniken). A-B) Ett schema över den experimentella installationen (utförs i rökhuven). C) Brunnen på den glasbottnade skålen belagd med 50 μl källarmembranmatris. D) Skålar(er) placerade i en cellkulturinkubator (vid 37 °C med 5% CO2) för att tillåta matrisen att stelna i minst 30 min. E) Cellerna trypsinise…
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).