Test della membrana basale della coltura 3D: coltivare le cellule tumorali sulla matrice proteica della membrana basale 3D per studiare l'invasione cellulare
Questo video fornisce una metodologia dettagliata per far crescere le cellule tumorali del seno in una matrice proteica della membrana basale 3D, esemplificando il potenziale della coltura 3D nella valutazione dell’invasione cellulare nell’ambiente circostante.
Protocol
1. Coltura tridimensionale delle cellule tumorali del seno nella matrice della membrana basale (la tecnica di incorporamento) Manipolazione della matrice della membrana basale Matrigel: Disgelo sul ghiaccio durante la notte a 4 °C. La matrice della membrana basale è liquida a bassa temperatura ma si solidifica a temperatura ambiente. Mantenere la matrice della membrana basale sulghiaccio (figure 1A-B). Coprire il piatto confocale n. 1 con fondo di vetro con 50 μl …
Representative Results
Figura 1. Coltura tridimensionale delle cellule tumorali mammali MDA-MB-231 nella matrice della membrana basale (la tecnica di incorporamento). A-B) Schema della configurazione sperimentale (eseguita nella cappa dei fumi). C) Il pozzo del piatto con fondo di vetro rivestito con 50 μl di matrice a membrana basale. D) Piatti collocati in un incubatore di coltura cellulare (a 37 °C con 5% di CO2) per consentire alla matric…
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).