/
/
In vitro Selectie van gemanipuleerde transcriptionele repressoren voor gerichte epigenetische uitschakeling
This content is Free Access.
Chapitres
- 00:05Introduction
- 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
- 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
- 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
- 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
- 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
- 09:23Conclusion
Hier presenteren we een protocol voor de in vitro selectie van gemanipuleerde transcriptionele repressoren (ETR's) met een hoge, langdurige, stabiele, on-target uitschakelingsefficiëntie en een lage genoombrede, off-target activiteit. Deze workflow maakt het mogelijk om een initieel, complex repertoire van kandidaat-ETR's terug te brengen tot een shortlist, geschikt voor verdere evaluatie in therapeutisch relevante settings.
