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Indagine sul ruolo trascrizionale di un silenziatore intronico RUNX1 di CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein acuta
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells
DOI:

09:16 min

September 01, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:16crRNA Design and Preparation of Cas9/gRNA RNP Complexes
  • 02:16Electroporation of RNP Complexes into OCI-AML3 Cells
  • 03:12Screening and Selection of Cell Clones with Biallelic Deletions
  • 05:51Functional Analyses of Silencer Deletions with Real-time Quantitative RT-PCR
  • 07:18Results: RUNX1 Intronic Silencer Deletion
  • 08:16Conclusion

Summary

Traduction automatique

La somministrazione diretta di complessi preassemblati di ribonucleoproteina di RNA Cas9/guide è un mezzo veloce ed efficiente per l'editing del genoma nelle cellule ematopoietiche. Qui, utilizziamo questo approccio per eliminare un silenziatore intronico RUNX1 ed esaminare le risposte trascrizionali nelle cellule leucemiche OCI-AML3.

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