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Untersuchung der Transkriptionsrolle eines RUNX1 Intronic Schalldämpfers durch CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in akuten myeloischen Leukämiezellen
Journal JoVE
Génétique
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Journal JoVE Génétique
Investigation of the Transcriptional Role of a RUNX1 Intronic Silencer by CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein in Acute Myeloid Leukemia Cells
DOI:

09:16 min

September 01, 2019

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Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:16crRNA Design and Preparation of Cas9/gRNA RNP Complexes
  • 02:16Electroporation of RNP Complexes into OCI-AML3 Cells
  • 03:12Screening and Selection of Cell Clones with Biallelic Deletions
  • 05:51Functional Analyses of Silencer Deletions with Real-time Quantitative RT-PCR
  • 07:18Results: RUNX1 Intronic Silencer Deletion
  • 08:16Conclusion

Summary

Traduction automatique

Die direkte Lieferung von vormontierten Cas9/Guide-RNA-Ribonukleoprotein-Komplexen ist ein schnelles und effizientes Mittel zur Genombearbeitung in hämatopoetischen Zellen. Hier nutzen wir diesen Ansatz, um einen RUNX1 intronic Schalldämpfer zu löschen und die Transkriptionsreaktionen in OCI-AML3-Leukämischen Zellen zu untersuchen.

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