Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Titre
- 00:39Preparation of Crude Mitochondrion from Maize Developing Kernels
- 01:45RNA 5’ Polyphosphatase Treatment and Circularization
- 02:33Reverse Transcription and Normalization
- 03:30PCR Amplification and Determination of Transcript Termini
- 04:34Verification of the cRT-PCR Mapping Results by RNA Gel Blot Hybridization
- 05:00Discrimination of Primary and Processed 5’ Ends
- 05:26Determination of Maize mRNA Termini Using the Circular RT-PCR-based Strategy
- 07:05Conclusion
हम परिपत्र आरटी-पीसीआर, मात्रात्मक आरटी-पीसीआर, आरएनए 5' पॉलीफॉस्फेटस-उपचार, और उत्तरी दाग के संयोजन के द्वारा एक परिपत्र आरटी-पीसीआर आधारित रणनीति प्रस्तुत करते हैं। इस प्रोटोकॉल अस्थिर 5' ट्राइफॉस्फेट के प्रभाव को कम करने के लिए एक सामान्यीकरण कदम भी शामिल है, और यह भेदभाव और प्राथमिक और संसाधित प्रतिलिपि stably मक्का mitochondrion में जमा मानचित्रण के लिए उपयुक्त है.
