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L'utilisation d'un PCR-capillaire fluorescent Gel Electrophoresis Technique pour Génotype CRISPR / cas9 médiation Knockout Mutants dans un format à haut débit
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Using a Fluorescent PCR-capillary Gel Electrophoresis Technique to Genotype CRISPR/Cas9-mediated Knockout Mutants in a High-throughput Format
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L'utilisation d'un PCR-capillaire fluorescent Gel Electrophoresis Technique pour Génotype CRISPR / cas9 médiation Knockout Mutants dans un format à haut débit

DOI:
10.3791/55586-v

•

08:25 min

•

April 08, 2017

•

, , ,
1Cancer & Stem Cell Biology Programme,Duke-NUS Medical School

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:55Sample Preparation and Amplification of CRISPER/Cas9 Regions with Fluorescent PCR
  • 04:32Capillary Gel Electrophoresis and Electropherogram Analysis
  • 06:25Results: Genotyping HEPG2 Targeted with CRISPER/Cas9 Construct Against NAP1L1
  • 07:27Conclusion

Summary

Traduction automatique

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La technique de génotypage décrit ici, qui couple de réaction en chaîne par polymérase fluorescente (PCR) à une électrophorèse sur gel capillaire, permet de génotypage à haut débit des clones knock-out à médiation par nuclease. Il évite les limitations rencontrées par d'autres techniques de génotypage et est plus rentable que les méthodes de séquençage.

Tags

CRISPR/Cas9Knockout MutantsGenotypingFluorescent PCRCapillary Gel ElectrophoresisHigh-throughputCell CultureCloningCell LysisPCR

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