Verstrekt hier is een protocol dat details stappen om een diermodel van chronische post-ischemie pijn (CPIP) te vestigen. Dit is een goed herkend model nabootsen van humaan complex regionaal pijnsyndroom type-I. Mechanische en thermische overgevoeligheid worden verder geëvalueerd, evenals capsaïcine-geïnduceerde nocifensieve gedrag waargenomen in de CPIP rat model.
Complex regionaal pijnsyndroom type-I (CRPS-I) is een neurologische aandoening die ernstige pijn bij patiënten veroorzaakt en blijft een onopgeloste medische aandoening. Echter, de onderliggende mechanismen van CRP’S-ik moet nog worden onthuld. Het is bekend dat ischemie/reperfusie een van de belangrijkste factoren is die CRP’S-I veroorzaakt. Door middel van langdurige ischemie en reperfusie van de Hind ledemaat, de rat chronische post-ischemie pijn (CPIP) model is opgericht om te imiteren CRPS-I. Het CPIP-model is uitgegroeid tot een goed herkend diermodel voor het bestuderen van de mechanismen van CRPS-I. Dit protocol beschrijft de gedetailleerde procedures die betrokken zijn bij de oprichting van het Rat model van CPIP, met inbegrip van anesthesie, gevolgd door ischemie/reperfusie van de achterledemaat. Kenmerken van het Rat CPIP-model worden verder geëvalueerd door het meten van de mechanische en thermische overgevoeligheden van de achterste ledemaat, alsmede de nocifensieve reacties op acute capsaïcine injectie. De rat CPIP model vertoont verschillende CRPS-I-achtige manifestaties, met inbegrip van Hind ledemaat oedeem en hyperemie in de vroege fase na de oprichting, aanhoudende thermische en mechanische overgevoeligheid, en verhoogde nocifensieve reacties op acute capsaïcine injectie. Deze kenmerken maken het een geschikt diermodel voor verder onderzoek van de mechanismen die betrokken zijn bij CRP’S-I.
Complex regionaal pijnsyndroom (crp’s) reprents complexe en chronische pijn symptomen als gevolg van fracturen, trauma, chirurgie, ischemie of zenuw letsel1,2,3. CRP’S is ingedeeld in 2 subcategorieën: CRPS type-I en type-II (CRPS-I en CRPS-II)4. Epidemiologische studies toonden aan dat de prevalentie van CRP’S ongeveer 1:20005was. CRPS-I, die geen duidelijke zenuwbeschadiging vertoont, kan resulteren in chronische pijn en heeft een dramatische invloed op de levenskwaliteit van de patiënten. Huidige beschikbare behandelingen vertonen ontoereikende therapeutische effecten. Daarom blijft CRPS-I nog steeds een belangrijk en uitdagend klinisch probleem dat moet worden aangepakt.
Vaststelling van een preklinische diermodel nabootsen van CRP’S-I is cruciaal voor het verkennen van de mechanismen die onderliggende CRP’S-I. Om dit probleem aan te pakken, ontwierp Coderre et al. een rat-model door langdurige ischemie en reperfusie toe te passen op het achterlijf om CRP’S-I6te recapituleren. Het is bekend dat ischemie/reperfusie letsel behoort tot een van de belangrijkste oorzaken van CRPS-I7. De rat CPIP model vertoont veel CRPS-I-achtige symptomen, waaronder Hind ledemaat oedeem en hyperemie in de vroege fase na de oprichting van het model, gevolgd door aanhoudende thermische en mechanische overgevoeligheid6. Met de hulp van dit model, wordt voorgesteld dat centrale pijn sensibilisatie, perifere TRPA1 kanaal activering en reactieve zuurstof soorten generatie, etc. bijdragen aan CRPS-I8,9,10. We hebben onlangs met succes de CPIP rat model en uitgevoerd RNA-sequencing van de dorsale wortel ganglia (Drg’s) die innervate de aangetaste Hind paw11. We ontdekten een aantal mogelijke mechanismen die mogelijk betrokken zijn bij het bemiddelen van de pijn overgevoeligheden van CRPS-I11. We verder geïdentificeerd voorbijgaande receptor potentiële vanilloid 1 (TRPV1) kanaal in DRG neuronen als een belangrijke bijdrage aan de mechanische en thermische overgevoeligheden van CRPS-I12.
In deze studie, we beschreven de gedetailleerde procedures die betrokken zijn bij de oprichting van de rat model van CPIP. We evalueerden verder het Rat CPIP-model door het meten van de mechanische en thermische overgevoeligheid, alsmede de responsiviteit op acute capsaïcine Challenge. Wij stellen voor dat het Rat CPIP-model een betrouwbaar diermodel kan zijn voor verder onderzoek naar de mechanismen die betrokken zijn bij CRP’S-I.
Dit protocol beschrijft de gedetailleerde methoden voor het vaststellen van een rat CPIP-model door het toepassen van ischemie/reperfusie op achterpoten van de ratten. Het gaat om de evaluatie van het uiterlijk van de achterledematen, oedeem, mechanische/thermische overgevoeligheid en acuut nocifensief gedrag in reactie op capsaïcine injectie.
Ledemaat ischemie/reperfusie is een gemeenschappelijke factor die bijdraagt aan CRPS-I bij menselijke patiënten12. Dit protoco…
The authors have nothing to disclose.
Dit project werd gesponsord door National Natural Science Foundation of China (81873365 en 81603676), Zhejiang provinciale natuurwetenschappelijke fondsen voor eminente jonge geleerden (LR17H270001) en onderzoeksfondsen van de Zhejiang Chinese Medical University ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |