此处提供了一个协议,详细说明了建立慢性缺血后疼痛(CPIP)动物模型的步骤。这是一个公认的模型,模仿人类复杂的区域疼痛综合征I型。进一步评价机械和热超敏感性,以及在CPIP大鼠模型中观察到的辣椒素引起的角感行为。
复杂的区域疼痛综合征I型(CRPS-I)是一种神经系统疾病,在患者中引起剧烈疼痛,并且仍然是一个未解决的医疗状况。然而,CRPS-I的基本机制尚未透露。众所周知,缺血/再灌注是导致CRPS-I的主要因素之一。通过长期缺血和后肢再灌注,建立了大鼠慢性缺血后疼痛(CPIP)模型,以模仿CRPS-I。CPIP模型已成为研究CRPS-I机制的公认动物模型。该协议描述了建立CPIP大鼠模型所涉及的详细程序,包括麻醉,然后是后肢缺血/再灌注。通过测量后肢的机械和热超敏感性以及急性辣椒素注射的角质反应,进一步评价大鼠CPIP模型的特征。大鼠CPIP模型表现出几种CRPS-I样的表现,包括建立后早期后肢水肿和高血症,持续热和机械过敏,以及急性辣椒素注射增加的角质反应。这些特性使其成为进一步研究CRPS-I中涉及的机制的合适动物模型。
复杂的区域疼痛综合征 (CRPS) 引起骨折、创伤、手术、缺血或神经损伤1、2、3引起的复杂和慢性疼痛症状。CRPS分为2个子类别:CRPS类型I和II型(CRPS-I和CRPS-II)4。流行病学研究表明,CRPS的流行率约为1:20005。CRPS-I,显示没有明显的神经损伤,可能导致慢性疼痛,并极大地影响患者的生活质量。目前可用的治疗方法显示治疗效果不足。因此,CRPS-I 仍然是一个需要解决的重要且具有挑战性的临床问题。
建立模仿CRPS-I的临床前动物模型对于探索CRPS-I背后的机制至关重要。为了解决这个问题,Coderre等人设计了一个大鼠模型,将长期缺血和再灌注到后肢,以重述CRPS-I6。据了解,缺血/再灌注损伤是CRPS-I7的主要原因之一。大鼠CPIP模型表现出许多CRPS-I样的症状,包括后肢水肿和高血症在模型建立后的早期阶段,其次是持续热和机械高灵敏度6。在此模型的帮助下,建议中央疼痛敏化、外周TRPA1通道激活和活性氧物种生成等对CRPS-I8、9、10作出贡献。我们最近成功地建立了CPIP大鼠模型,并进行了背根结核(DRGs)的RNA测序,内骨对受影响的后爪11进行内脏测序。我们发现了一些潜在的机制,可能参与调解CRPS-I11的疼痛过度敏感。我们进一步确定DRG神经元中的瞬态受体电位万能1(TRPV1)通道是CRPS-I12的机械和热超灵敏度的重要原因。
在这项研究中,我们描述了建立CPIP的老鼠模型所涉及的详细程序。通过测量机械和热超敏感性及其对急性辣椒素挑战的反应能力,我们进一步评估了大鼠CPIP模型。提出大鼠CPIP模型是进一步研究CRPS-I中相关机制的可靠动物模型。
该协议描述了通过在大鼠后肢应用缺血/再灌注来建立大鼠CPIP模型的详细方法。它涉及评估后肢外观,水肿,机械/热过敏性,和急性角质行为,以回应辣椒素注射。
肢体缺血/再灌注是导致CRPS-I在人类患者12的常见因素。该协议描述了如何建立大鼠CPIP模型,这是一个常用的动物模型来概括人类CRPS-I6。在麻醉下,在大鼠的后肢诱导了缺血,在…
The authors have nothing to disclose.
该项目由中国国家自然科学基金(81873365和81603676)、浙江省杰出青年自然科学基金(LR17H270001)和浙江中医药大学()资助。Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |