Bu video, padi enzim inhibitörü ve BB-Cl-amidinin meme kanseri tümörojenite in vitro üzerindeki etkilerini test etmek için yumuşak bir agar kolonisi oluşumunu açıklar. Bu tahlil aynı zamanda hücre dönüşüm potansiyelinin genetik pertürbasyonlar bağlamında nicel olarak değerlendirilmesini sağlar.
Protocol
1. % 3 Hazırlanması 2-Hidroksetil Agarose Temiz, kuru 100 ml cam şişeye 0,9 g 2 hidroksiyetil agarose (Agarose VII) ve ardından 30 ml damıtılmış su ekleyin. Karışımı 15 saniye mikrodalgaya koyun ve hafifçe döndürün. Agarose tozu tamamen çözünene kadar bu adımı en az üç kez daha tekrarlayın. Çözelti içeren şişeyi 15 dakika boyunca otoklavlayın. Daha fazla kullanmadan önce agarose çözeltisinin RT’ye soğumasını bekleyin. Çözümü RT’de saklayın….
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
Zeiss Axiopot
Carl Zeiss Microscopy
1021859251
Inverted Microscope
Olympus
CKX41
DMEM/F-12
Lonza BioWhittaker
12-719F
HyClone Donor Equine Serum
Fisher Scientific
SH30074.03
Penicillin Streptomycin
Life Technologies
15140-122
2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).