Soft Agar Colony Formation Assay: Une méthode pour tester les effets de nouveaux composés sur la prolifération des cellules cancéreuses

Published: April 30, 2023

Abstract

Source : Horibata A. et coll., Utilization of the Soft Agar Colony Formation Assay to Identify Inhibitors of Tumorigenicity in Breast Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2015).

Cette vidéo décrit un essai doux de formation de colonie d’agar pour tester les effets d’un inhibiteur d’enzyme de PADI et de BB-Cl-amidine sur la tumorigénicité de cancer du sein in vitro. Cet essai permet également l’évaluation quantitative du potentiel de transformation cellulaire dans le contexte des perturbations génétiques.

Protocol

1. Préparation de 3% 2-Hydroxyethyl Agarose Dans une bouteille en verre propre et sèche de 100 ml, ajouter 0,9 g d’agarose 2 hydroxyéthyle (Agarose VII) suivie de 30 ml d’eau distillée. Cuire le mélange au micro-ondes pendant 15 secondes et tourbillonner doucement. Répétez cette étape au moins trois fois de plus jusqu’à ce que la poudre d’agarose se dissolve complètement. Autoclave la bouteille contenant des solutions pendant 15 min. Laissez refroidir la solution …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Materials

Zeiss Axiopot   Carl Zeiss Microscopy 1021859251
Inverted Microscope   Olympus CKX41
DMEM/F-12   Lonza BioWhittaker 12-719F
HyClone Donor Equine Serum  Fisher Scientific  SH30074.03
Penicillin Streptomycin   Life Technologies 15140-122
2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature   Sigma-Aldrich 39346-81-1

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Citer Cet Article
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).

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