Cette vidéo décrit un essai doux de formation de colonie d’agar pour tester les effets d’un inhibiteur d’enzyme de PADI et de BB-Cl-amidine sur la tumorigénicité de cancer du sein in vitro. Cet essai permet également l’évaluation quantitative du potentiel de transformation cellulaire dans le contexte des perturbations génétiques.
Protocol
1. Préparation de 3% 2-Hydroxyethyl Agarose Dans une bouteille en verre propre et sèche de 100 ml, ajouter 0,9 g d’agarose 2 hydroxyéthyle (Agarose VII) suivie de 30 ml d’eau distillée. Cuire le mélange au micro-ondes pendant 15 secondes et tourbillonner doucement. Répétez cette étape au moins trois fois de plus jusqu’à ce que la poudre d’agarose se dissolve complètement. Autoclave la bouteille contenant des solutions pendant 15 min. Laissez refroidir la solution …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
Zeiss Axiopot
Carl Zeiss Microscopy
1021859251
Inverted Microscope
Olympus
CKX41
DMEM/F-12
Lonza BioWhittaker
12-719F
HyClone Donor Equine Serum
Fisher Scientific
SH30074.03
Penicillin Streptomycin
Life Technologies
15140-122
2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).