Cette vidéo décrit la dissociation non enzymatique du tissu humain frais pour obtenir des cellules viables. La technique est utilisée pour l’analyse qualitative et quantitative des cellules positives CD45 (lymphocytes/leucocytes) présentes dans divers tissus humains normaux et malins.
Protocol
1. Préparation de l’homogénéité tissulaire Les tissus réséqués disséqués (tissus malins et normaux réséqués de la salle d’opération) sont dans le laboratoire de pathologie par du personnel qualifié pour un ramassage immédiat. La tumeur, le NANT (pris la distance la plus éloignée possible de la tumeur) et les fragments normaux de tissu sont systématiquement traités dans un délai de 1 à 3 heures de l’excision chirurgicale dans un laboratoire de BSL2 utilisant des procédures standard de…
Representative Results
Figure 1 : Diagramme de flux de protocole. Notre procédure de traitement des tissus humains frais et certaines approches analytiques qui peuvent ensuite être utilisées pour évaluer les lymphocytes infiltrant les tissus humains sont montrées. Figure 2 : Image souillée de H&E d’une empreinte de ti…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
GentleMacs Dissociator
Miltenyi Biotec
130-093-235
BD Medimachine is somewhat equivalent
Centrifuge 5810 R
Eppendorf
or other standard table top centrifuge
Centrifuge 5417 R
Eppendorf
or other standard microcentrifuge
Esco Class II A2 Biosafety Cabinet
ESCO global
or other standard BSL2 hood
Inverted Microscope
Nikon eclipse TS100
or other microscope compatible for a hemacytometer