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Producción de vectores de virus adenoasociados en pilas celulares para estudios preclínicos en modelos animales grandes
JoVE Revista
Inmunología y contagio
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JoVE Revista Inmunología y contagio
Production of Adeno-Associated Virus Vectors in Cell Stacks for Preclinical Studies in Large Animal Models
DOI:

07:21 min

June 30, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:46Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks
  • 02:30Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells
  • 03:23AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography
  • 05:45Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG
  • 06:41Conclusion

Summary

Traducción Automática

Aquí proporcionamos un procedimiento detallado para la producción a gran escala de vectores AAV de grado de investigación utilizando células HEK 293 adherentes cultivadas en pilas celulares y purificación por cromatografía de afinidad. Este protocolo produce consistentemente >1 x 1013 genomas vectoriales / ml, proporcionando cantidades vectoriales apropiadas para estudios con animales grandes.

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