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Bioquímica
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通过 FASP 消化和数据独立分析,EPS-尿液的蛋白质配置文件
JoVE Revista
Bioquímica
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JoVE Revista
Bioquímica
Proteomic Profile of EPS-Urine through FASP Digestion and Data-Independent Analysis
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通过 FASP 消化和数据独立分析,EPS-尿液的蛋白质配置文件
DOI:
10.3791/62512-v
•
14:48 min
•
May 08, 2021
•
Licia E. Prestagiacomo
,
Caterina Gabriele
,
Paola Morelli
,
Maria Antonietta Rota
,
Stefano Alba
,
Giovanni Cuda
,
Rocco Damiano
,
Marco Gaspari
1
Research Centre for Advanced Biochemistry and Molecular Biology, Department of Experimental and Clinical Medicine
,
Magna Graecia University of Catanzaro
,
2
Department of Health Science
,
Magna Graecia University of Catanzaro
,
3
Romolo Hospital
,
4
Department of Experimental and Clinical Medicine
,
Magna Graecia University of Catanzaro
Capítulos
00:00
Introduction
00:55
Protocol
01:25
Protocol: FASP Digestion
05:29
Protocol: SCX Purification
08:08
Protocol: Protein Quantifcation by External Standard
09:23
Protocol: NanoLC-MS/MS and DIA Analysis
11:31
Protocol: High-pH C18 Fractionation for Spectral Library
13:09
Protocol: Data Analysis
13:35
Expected Results
13:53
Conclusion
Summary
Traducción Automática
English (Original)
العربية (Arabic)
中文 (Chinese)
Nederlands (Dutch)
français (French)
Deutsch (German)
עברית (Hebrew)
italiano (Italian)
日本語 (Japanese)
한국어 (Korean)
português (Portuguese)
русский (Russian)
español (Spanish)
Türkçe (Turkish)
Traducción Automática
在这里,我们提出了一个优化的过滤消化协议,并提供了以下详细信息:蛋白质消化、肽纯化和数据独立获取分析。该策略应用于对表达的前列腺分泌物-尿液样本的分析,并允许高蛋白体覆盖率和低缺失值无标签尿素分析。
Tags
Proteomic Profile
EPS-urine
FASP Digestion
Data-independent Analysis
Mass Spectrometry
Biomarker Discovery
Prostate Cancer
Centrifugation
Sample Preparation
Protein Alkylation
Urea Buffer
Iodoacetamide
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