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Aspectos práticos da preparação e configuração da amostra de 1H R1ρ Experimentos de dispersão de relaxamento do RNA
JoVE Revista
Bioquímica
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JoVE Revista Bioquímica
Practical Aspects of Sample Preparation and Setup of 1H R1ρ Relaxation Dispersion Experiments of RNA

Aspectos práticos da preparação e configuração da amostra de 1H R1ρ Experimentos de dispersão de relaxamento do RNA

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08:17 min

•

July 09, 2021

DOI:

10.3791/62470-v

DOI:
10.3791/62470-v

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08:17 min
July 09, 2021

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1Department of Medical Biochemistry and Biophysics,Karolinska Institutet

Summary

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Apresentamos um protocolo para medir a dinâmica micro a milissegundo em 13C/15N rotulado e sem rótulo RNA com 1H R1ρ de dispersão nuclear de ressonância magnética (NMR). O foco deste protocolo está na preparação e configuração de amostras de alta pureza de experimentos de RMN.

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RNA Sample PreparationNMR SetupProton R1ρ Relaxation DispersionConformational ExchangeIn Vitro TranscriptionRNase H CleavageHPLC PurificationNMR Tube CleaningD2O Addition

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Feyrer, H., Schlagnitweit, J., Petzold, K. Practical Aspects of Sample Preparation and Setup of 1H R1ρ Relaxation Dispersion Experiments of RNA. J. Vis. Exp. (173), e62470, doi:10.3791/62470 (2021).

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