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Le silençage du gène médiévirus lentiviral dans le pseudoislet humain préparé dans les plaques à faible attachement
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Lentiviral Mediated Gene Silencing in Human Pseudoislet Prepared in Low Attachment Plates
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Le silençage du gène médiévirus lentiviral dans le pseudoislet humain préparé dans les plaques à faible attachement

5,282 Views

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11:24 min

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May 14, 2019

DOI:

10.3791/59578-v

DOI:
10.3791/59578-v

•

11:24 min
May 14, 2019

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1Department of Internal Medicine, Carver College of Medicine,University of Iowa, 2Fraternal Order of Eagles Diabetes Research Center,University of Iowa, 3Roy J. Carver Department of Biomedical Engineering,University of Iowa

Summary

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Un protocole pour créer des pseudoislets humains modifiés de gène des cellules humaines dispersées d'îlots qui sont transduced par lentivirus portant l'ARN court d'épingle à cheveux (shRNA) est présenté. Ce protocole utilise des vaisseaux d'enzymes et de culture facilement disponibles, peut être exécuté facilement, et produit des pseudoislets humains génétiquement modifiés appropriés pour des études fonctionnelles et morphologiques.

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LentiviralGene SilencingHuman PseudoisletLow Attachment PlatesIslet FunctionGene Expression ModulationSHR8 TransductionProteolytic EnzymeCollagenolytic EnzymeCell DissociationCMRL MediumFetal Bovine Serum

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Liu, S., Harata, M., Promes, J. A., Burand, A. J., Ankrum, J. A., Imai, Y. Lentiviral Mediated Gene Silencing in Human Pseudoislet Prepared in Low Attachment Plates. J. Vis. Exp. (147), e59578, doi:10.3791/59578 (2019).

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