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Split-BioID — Proteomic análise de complexos de proteínas específicas do contexto em seu ambiente nativo do celular
JoVE Revista
Bioquímica
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Split-BioID — Proteomic Analysis of Context-specific Protein Complexes in Their Native Cellular Environment

Split-BioID — Proteomic análise de complexos de proteínas específicas do contexto em seu ambiente nativo do celular

DOI:
10.3791/57479-v

•

09:02 min

•

April 20, 2018

•

,
1Cluster of excellence CellNetworks,Heidelberg University, 2Heidelberg University Biochemistry Center (BZH)

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:46Split-BioID for Proteomics Studies
  • 02:54Streptavidin Pulldown
  • 05:03SDS-PAGE and Western Blotting
  • 06:21Results: Protein Expression and Biotinylation Through Split-BioID
  • 08:04Conclusion

Summary

Traducción Automática

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Nós fornecemos um protocolo passo a passo para dividir-BioID, um ensaio de fragmentos-complementação de proteínas com base na técnica de criação de etiquetas de proximidade BioID. Ativado na interação das duas proteínas determinadas, permite a análise proteômica de contexto-dependente da proteína em seu ambiente nativo do celular. O método é simples e econômica e só requer equipamentos de laboratório padrão.

Tags

Split-BioIDProteomic AnalysisProtein ComplexesNative Cellular EnvironmentProtein Fragment Complementation AssayProximity-dependent Protein BiotinylationCell BiologyMass Spectrometric AnalysisStreptavidin PulldownProtein Complexes RemodelingContext-specific Protein Complexes

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