Journal
/
Bioquímica
/
Uma Abordagem DNA afinidade G-quadruplex para a purificação de enzimaticamente activa G4 Resolvase1
JoVE Revista
Bioquímica
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido.  Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
JoVE Revista Bioquímica
A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1

Uma Abordagem DNA afinidade G-quadruplex para a purificação de enzimaticamente activa G4 Resolvase1

DOI:
10.3791/55496-v

•

11:25 min

•

March 18, 2017

•

, , , , ,
1Department of Cancer Biology,Wake Forest School of Medicine, 2YX Genomics, 3Department of Biology,Ball State University, 4Department of Hematology and Oncology,Roper St. Francis Hospital

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:54Lyse Bacterial Pellets Expressing Human Recombinant G4 Resolvase1 (rG4R1)
  • 03:06Prepare G4-magnetic Beads
  • 04:07Bind Histidine-tagged rG4R1 to Cobalt Beads
  • 05:47Elute rG4R1 from Cobalt Beads
  • 07:07Bind rG4R1 to G4-bound SPB and Elute in an ATP-dependent Manner
  • 08:55Results: Analysis and Quantification of Catalytically Active, Purified rG4R1
  • 10:06Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

G4 Resolvase1 liga-se a (G4) estruturas G-quadruplex com mais apertados afinidade reportada para uma proteína de ligação e G4 representa a maior parte da actividade de desenrolamento-G4 ADN em células HeLa. Nós descrevemos um protocolo romance que aproveita a afinidade e atividade desenrolamento dependente de ATP G4-Resolvase1 para purificar especificamente G4R1 recombinante cataliticamente ativo.

Tags

G-quadruplex DNAG4 Resolvase1Enzymatic PurificationATP-dependent PurificationRecombinant ProteinBacterial ExpressionCatalytically Active EnzymeLysozymeProtease InhibitorSonicationCentrifugationStreptavidin Paramagnetic Beads

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Dirigido Embalagem Proteína da Membrana Externa no interior de vesículas<em> Escherichia coli</em>: Concepção, produção e purificação

Expressão, Purificação e Actividade Antimicrobiana de S100A12

Método para dobrar eficiente e purificação do Chemoreceptor Ligand Binding Domain

Purificação e reconstituição de TRPV1 para análise espectroscópica

Purificação de proteínas anaeróbica e análise cinética através do eletrodo de oxigênio para estudar a inibição e atividade dioxigenase DesB

Identificação de substratos de quinase CK2 novela usando uma abordagem bioquímica versátil

Uma abordagem personalizável para a produção enzimática e purificação de produtos naturais de Diterpenóides

Análise celular única de alelos ativos transcricionralmente por peixe de molécula única

Isolamento da Caenorhabditis Ativa elegans Extrato Nuclear e Reconstituição para Transcrição In Vitro

Modelando um site ativo enzimático usando freeware de visualização molecular

Read Article