Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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La pressione interstiziale del fluido o IFP è la forza esercitata dal fluido negli spazi tra le cellule di un tessuto. In primo luogo, anestetizzare un topo portante di tumore con il 2% di isofluoro mescolato con ossigeno e immobilizzarlo sulla tomografia computerizzata o sulla piattaforma robotica CT-IFP. Ora, iniettare nella vena laterale della coda di un topo con liposomi incapsulati con un agente di contrasto per visualizzare il tumore. Riportare l'animale nella sua gabbia e lasciarlo recuperare.
Tra le 48 e le 72 ore dopo l'iniezione, fissare il mouse anestetizzato sulla piattaforma CT-IFP e selezionare alcune posizioni uniformemente distanziate sul tumore per misurare l'IFP. Successivamente, sciacquare l'ago del sistema IFP con una soluzione salina di eparina prima dell'inserimento. Portare l'ago nella posizione selezionata e inserirlo all'interno del tessuto tumorale.
Ora acquisisci immagini in tutte le posizioni e misura l'IFP utilizzando il software. L'IFP nel tumore è solitamente alto a causa della sua natura densa, dei vasi sanguigni anomali e del sistema linfatico difettoso. Ciò può portare all'accumulo di liposomi nella periferia tumorale. Nel seguente protocollo, dimostreremo la tecnica per misurare l'IFP in un tumore solido.
Per misurare l'IFP, nastro l'animale sulla piattaforma robot CT-IFP, in modo che il tumore sia immobilizzato e accessibile al sistema robot CT-IFP. Ottenere una micro TAC anatomica come appena dimostrato, quindi caricare i dati di inserimento preneedle nel software di allineamento del robot CT-IFP e regolare la finestra e il livello per visualizzare il tumore. Clicca sul bordo del tumore in qualsiasi immagine, seguito dalla selezione di una seconda posizione del bordo sul lato adiacente del tumore.
Il software calcolerà una serie di posizioni lungo una linea lineare tra i due punti. Quindi selezionate le coordinate x, y e z per una serie di cinque-otto posizioni distanziate uniformemente dall'elenco. Successivamente sciacquare l'ago del sistema IFP con una soluzione di eparina salina ed inserire le prime posizioni predeterminate dell'ago nelle finestre di coordinate XYZ del software di controllo del robot CT-IFP.
Premere il pulsante Vai per spostare il robot nella posizione desiderata. Quindi, per ogni posizione dell'ago a sua volta, fare clic sul pulsante Inserisci ago per inserire l'ago nel tessuto. Pizzicare e rilasciare i tubi PE-20 per confermare una buona comunicazione fluida tra l'ago IFP e il tessuto e osservare che la misurazione IFP aumenta e ritorna al valore di pre-pizzicamento sul software di acquisizione IFP. Infine, acquisire una TAC anatomica con l'ago inserito, facendo clic sul pulsante Retract Needle alla fine della scansione per rimuovere l'ago dal tessuto.
