Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
ضغط السائل الخلالي أو IFP هو القوة التي يمارسها السائل في المسافات بين الخلايا في الأنسجة. أولا، تخدير الماوس الحامل للورم مع 2٪ isofluorane مختلطة مع الأكسجين وشل الحركة على التصوير المقطعي المحوسب أو منصة الروبوت CT-IFP. الآن، حقن في الوريد الذيل الجانبي للفأر مع الليبوسومات مغلفة مع عامل التباين لتصور الورم. أعد الحيوان إلى قفصه ودعه يتعافى
بين 48 إلى 72 ساعة بعد الحقن، وتأمين الماوس تخدير على منصة CT-IFP واختيار عدد قليل من المواقف متباعدة بالتساوي على الورم لقياس IFP. بعد ذلك، قم بتدفق إبرة نظام IFP بمحلول ملحي الهيبارين قبل الإدراج. أحضر الإبرة على الموضع المحدد وأدخلها داخل نسيج الورم.
الآن الحصول على الصور في جميع المواقف وقياس IFP باستخدام البرنامج. عادة ما يكون IFP في الورم مرتفعا نظرا لطبيعته الكثيفة والأوعية الدموية غير الطبيعية والجهاز اللمفاوي المعيب. وهذا قد يؤدي إلى تراكم الليبوسومات في محيط الورم. في البروتوكول التالي، سوف نظهر تقنية لقياس IFP في ورم صلب.
لقياس IFP، الشريط الحيوان على منصة الروبوت CT-IFP، بحيث يتم شل الورم ويمكن الوصول إليها لنظام الروبوت CT-IFP. الحصول على الأشعة المقطعية المجهرية التشريحية كما هو موضح للتو، ثم تحميل بيانات الإدراج قبل الضرورية في برنامج محاذاة الروبوت CT-IFP وضبط النافذة والمستوى لتصور الورم. انقر على حافة الورم في أي صورة ، تليها اختيار موقع حافة ثانية على الجانب المجاور للورم.
سيقوم البرنامج بحساب سلسلة من المواقف على طول خط خطي بين النقطتين. ثم حدد x و y و z-coordinates لسلسلة من خمسة إلى ثمانية مواقع متباعدة بالتساوي من القائمة. تدفق المقبل إبرة نظام IFP مع محلول الهيبارين المالحة وأدخل أول مواقف إبرة محددة سلفا في النوافذ تنسيق XYZ من برنامج التحكم الروبوت CT-IFP.
اضغط على زر الانتقال لنقل الروبوت إلى الموقع المطلوب. ثم لكل وضع إبرة بدوره، انقر فوق الزر إدراج إبرة لإدخال الإبرة في الأنسجة. قرصة والإفراج عن أنابيب PE-20 لتأكيد اتصال السوائل جيدة بين إبرة IFP والأنسجة ومراقبة أن قياس IFP يزيد ويعود إلى قيمة ما قبل معسر على برنامج اقتناء IFP. وأخيرا، الحصول على الأشعة المقطعية التشريحية مع الإبرة إدراجها، والنقر على زر تراجع إبرة في نهاية المسح الضوئي لإزالة الإبرة من الأنسجة.
