우로키나아제(Urokinase)형 플라스미노겐 활성제(Plasminogen Activator)에 의한 생쥐 요통 모델
Summary
마우스에서 요통 모델의 간단하고 신속한 유도를 위한 방법은 요로 플라스미노겐 활성제의 인대 내 주입을 사용하여 여기에서 제공됩니다.
Abstract
지속되는 허리 통증의 모델은 본원에 기술된 간단한 방법론으로 마우스에서 유도될 수 있다. 인간과 다른 동물에 존재하는 세린 프로테아제인 우로키나아제-유형 플라스미노겐 활성제(urokinase)의 주사를 사용하여 마우스에서 지속되는 요통 모델의 간단하고 신속한 유도를 위한 단계별 방법이 여기에 제공됩니다. 마우스에서 지속적인 허리 통증을 유도하는 방법은 요추의 인대 삽입 부위를 따라 우로키나아제를 간단히 주입하는 것입니다. 우로키나아제 염증제는 플라스미노겐을 플라스민으로 활성화시킵니다. 일반적으로 모델은 10분 이내에 유도될 수 있으며 과민증은 최소 8주 동안 지속됩니다.
과민성, 보행 장애 및 기타 표준 불안 및 우울증과 유사한 척도를 지속 모델에서 테스트할 수 있습니다. 허리 통증은 가장 흔한 유형의 통증입니다. 요통에 대한 인식을 개선하기 위해 국제통증연구협회(IASP)는 2021년을 “요통에 관한 글로벌 해”로, 2022년을 “통증 지식을 실무로 번역하는 글로벌 해”로 지정했습니다. 통증 치료제의 치료 발전에 대한 한 가지 한계는 지속성 및 만성 통증을 테스트하는 데 적합한 모델이 없다는 것입니다. 이 모델의 특징은 요통 및 그 부수적 특성의 감소를 목표로 하는 잠재적인 치료법을 테스트하는 데 적합하며, IASP가 2022년을 통증 지식을 실무로 번역하는 글로벌 연도로 지정하는 데 기여했습니다.
Introduction
요통은 전 세계적으로 5명 중 1명이 앓고 있는 가장 흔한 장애 원인중 하나입니다 1. 이러한 노력에도 불구하고, 통증 분야의 동물 연구, 특히 생쥐를 대상으로 한 동물 연구에서 널리 사용되는 신뢰할 수 있는 요통 동물 모델은 거의 없습니다. 이전 모델에서는 요추 후관절 2,3에 요로 플라스미노겐 활성제(uPA)를 주입하거나, 몸통 근육계에 신경 성장 인자(NGF)를 주입하거나4 요오드아세트산나트륨(MIA)5 또는 인터루킨-1베타6를 주입하여 유발하는 만성 요통(CBP)을 유도하기 위해 쥐를 거의 독점적으로 사용했다 추간판 주사. 물론, 쥐는 주로 더 큰 크기와 염증제 주입에 대한 접근 용이성 때문에 이러한 모델에 선호됩니다.
분명한 것은수년 동안 사용된 추간판 변성의 SPARC-null 마우스 모델과 같은 요통 마우스 모델이 존재하지만7 주사 기반 모델보다 확립하는 데 더 많은 비용과 시간이 소요된다는 것입니다. 최근 쥐 연구에서는 수직 만성 억제 스트레스와 함께 요근에 NGF 주입을 결합하여 요통 모델을 확립했다8. 다음 프로토콜에서는 마우스2에 대해 쥐의 uPA 유도 CBP 모델을 적용했습니다. 과민증은 1주일 이내에 확립되어 최대 6-8주까지 지속됩니다. 또한 쥐가 불안 및 우울증과 유사한 행동을 발달시킨다는 것을 확인했습니다. 요통의 유병률과 분자 통증 연구에서 마우스의 더 일반적인 사용을 감안할 때, 이 내구성 모델은 요통 완화를 위한 새로운 치료 전략 개발에 사용하기 위해 쉽게 확립됩니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 만성 요통 모델은 유발하기 쉬우며, 1주일 이내에 확립된 과민증은 최대 8주(그리고 가능하면 그 이상) 동안 지속될 수 있습니다. 이를 통해 한두 주 동안만 지속되는 다른 급성 모델과 달리 만성 통증 상태를 정확하게 연구할 수 있습니다. 생쥐에서 모델을 보여주지만, uPA 유도 CBP 모델은 쥐2에서도 확립될 수 있다. 이 모델의 장점은 장시간 경과가 만성 요통 환자에서 관찰되?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
보조금은 NIH HEAL UG3 NS123958에서 제공했습니다. 주택 시설은 AAALAC의 검사 및 인증을 받았습니다. 동물들은 실험실 직원과 실험실 및 동물 자원부(DLAR) 직원이 관리하는 동물 자원 센터(ARC) 수용 시설에 수용되었습니다. 행동 검사 절차는 미국 통증 학회(American Pain Society)와 국제 통증 연구 협회(International Association for the Study of Pain)에서 승인한 해당 분야의 표준 방법입니다. 안락사 방법은 미국 수의학 협회의 안락사 패널의 권고와 일치합니다.
Materials
| Animals and Consumables | |||
| 70% ethanol | Local Source | ||
| BALB/c mice | Envigo | 20-25 g | |
| Cotton balls | Fisher Scientific | 19-090-702 | |
| Cotton-tipped applicators | Fisher Scientific | 19-062-616 | |
| Isoflurane inhalant anesthetic | MedVet | RXISO-250 | |
| Labeling tape | Fisher Scientific | NGFP7002 | |
| Nitrile exam gloves | Fisher Scientific | ||
| Oxygen tank | Local Source | ||
| Surgical drape, Steri-Drape Utility Sheet, Absorbent Prevention | VWR | 76246-788 | cut into 15 x 15 cm pieces |
| Tygon tubing with 3 mm inner diameter | Grainger | 22XH87 | |
| Equipment | |||
| #11 carbon steel scalpel blades | VWR | 21909-612 | |
| Anesthesia induction chamber | Summit Medical Equipment Company | AS-01-0530-LG | |
| Autoclave | Local Unit | ||
| Biology Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11252-30 | |
| Glass bead sterilizer Germinator 500 | VWR | 102095-946 | |
| IITC Life Sciences Series 8 Model PE34 Hot/Cold Plate Analgesia Meter | IITC | PE34 | |
| Integra Miltex cotton & dressing pliers | Safco Dental Supply | 66-317 | |
| OPTIKA CL31 double arm LED illuminator | New York Microscope Company | OPCL-31 | |
| Plantar Test System with InfraRed Emitter, i. e. Hargreaves Apparatus | Ugo Basile | 37370-001 and 37370-002 | |
| Scalpel Handle No. 3 | VWR | 25607-947 | |
| Small animal heating pad | Valley Vet Supply | 47375 | |
| Student Vannas spring scissors, straight blade | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Table top animal research portable anesthesia workstation “PAM” | Patterson Scientific | AS-01-0007 | |
| Von Frey Filaments | Ugo Basile | 37450-275 |
Referencias
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