经口喂养和显微注射对成年蚊子进行实验性病毒感染

蚊媒病毒（MBV）是一组异质的RNA病毒，可以在蚊子媒介中持续存在，随后传播到脊椎动物宿主¹。临床上重要的MBV主要分布在四个病毒科，即黄病毒科、托加维里科、呼肠孤病毒科和2^，3。近几十年来，这些病毒已在全球范围内报道，导致公共卫生问题。作为最著名的MBV病毒之一，登革热病毒（DENV）在过去20年中已成为100多个国家中最流行的新兴或重新出现的虫媒病毒⁴。自在内陆发现寨卡病毒（ZIKV）以来，非洲大陆几乎所有热带和亚热带国家和地区都报告了人类寨卡病毒感染⁵。为了评估病毒传播的风险，近年来的许多研究都集中在^{这些病毒的}蚊媒能力上6^，7。因此，有效预防和控制病媒传播疾病至关重要。

埃及伊蚊（Ae. aegypti）是实验室中最容易饲养的蚊子之一，是登革热病毒、寨卡病毒、基孔肯雅病毒（CHIKV）和黄热病病毒（YFV）的重要载体⁸。长期以来， 埃及伊蚊 只在非洲大陆和东南亚发现，但近年来它几乎殖民了所有^大陆9。此外， 埃及伊蚊 的全球丰度一直在不断增长，到本世纪末估计将增加20%¹⁰。从2004年到2009年，由于日常气温升高， 中国埃及伊蚊 病媒能力明显增加¹¹. 埃及伊蚊 作为致病媒介的地位在中国显著上升。因此，为了应对这些挑战，有必要调查 埃及伊蚊传播病毒的媒介能力。

作为一种噬血节肢动物，雌性蚊子刺穿脊椎动物宿主的皮肤并以血液为食。蚊子偶尔会从感染病毒的宿主那里获取病毒，然后将病毒转移到新的宿主。因此，为了确定媒介能力，在实验室环境中通过喂食系统给蚊子喂食含有虫媒病毒的人工血粉¹²。单个蚊子在感染几天后被分成头部、身体和唾液分泌物。为了测量病毒感染、传播和传播速率，已通过定量逆转录 PCR （qRT-PCR） 或斑块测定法检测病毒滴度。然而，并非所有蚊子都会发生中肠感染，并且能够在血液喂养后将病毒转移到下一个宿主。它与蚊子的生理屏障有关，可以防止病原体穿透人体，并在其先天免疫力中起着至关重要的作用¹³。中肠屏障，特别是中肠感染屏障（MIB）和中肠逃逸屏障（MEB），会影响病毒是否可以全身感染媒介及其传播效率。它阻碍了对其他组织感染的分析，例如唾液腺也表现出唾液腺感染和逃逸屏障^13，14。为了更好地表征载体中内脏和唾液腺的感染，本文介绍了Ae中虫媒病毒经口喂养和胸内接种的详细方案 。 该方案可能适用于各种蚊媒中的其他虫媒病毒感染，例如 伊蚊 属中的DENV和ZIKV感染，并且可能被证明是一种可行的程序。