Overview
Este vídeo descreve uma técnica de mastectomia radical, que é usada para a remoção cirúrgica de toda a glândula mamária de um rato para estudar a progressão do câncer.
Protocol
1. Mastectomia
NOTA: O tempo da mastectomia é muito importante. Se for feito muito cedo, a metástase pulmonar não ocorre. Se for feito tarde demais, o tumor primário invadiu os principais vasos sanguíneos, o que torna uma ressecção oncológica completa desafiadora. Assim, vários pontos de tempo foram testados para mastectomia para determinar qual ponto de tempo produziu o equilíbrio adequado na espera por metástase antes que a ressecção se tornasse muito desafiadora. Depois de fazê-lo em mais de 50 experimentos com camundongos, foi demonstrado que a mastectomia aos 8 dias após a inoculação de células cancerosas (ou quando o tamanho do tumor atinge 5 mm) era o ponto ideal para alcançar esse equilíbrio.
- Anestesiar um rato com isoflurano de 2-4% e 0,2 L/min de oxigênio até que os ratos respirem calmamente (2-3 min) e injetem 0,05 mg/kg de buprenorfina em seu ombro subcutânea.
- Contenha os membros do camundongo usando fita de laboratório e esterilize sua pele usando clorexidina, iodo e 75% de etanol, usando cotonetes de algodão.
- Faça uma incisão de pele de 5 mm 2 mm à esquerda a partir da cicatriz cirúrgica que foi feita na inoculação inicial da célula cancerosa, utilizando a tesoura de microdisseção. Estender a incisão em direção à raiz do membro dianteiro para remover o tumor, a pele incluindo a cicatriz cirúrgica e a lesão em contato com o tumor, bem como a bacia do linfonodo axilar em que na maioria das vezes não existe linfonodo visível no momento da mastectomia. Certifique-se de não danificar a veia axilar.
- Feche os defeitos da pele costurando, utilizando suturas estéreis 5-0 não absorvíveis na forma de um "Y".
- Volte o mouse para uma gaiola limpa e monitor até que eles tenham se recuperado e estejam se movendo livremente (depois de ~1-2 min). Se um animal não parecer estar em boa saúde dentro de 24 horas de cirurgia, administre buprenorfina (0,2 mg/kg).
- Remova as suturas sob anestesia (com isoflurano de 2-4% e 0,2 L/min de fluxo de oxigênio) 7 dias após a cirurgia.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |