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Encyclopedia of Experiments

कट्टरपंथी मस्तूल: कैंसर प्रगति का अध्ययन करने के लिए एक माउस से पूरे स्तन ग्रंथि के सर्जिकल हटाने

Overview

यह वीडियो कट्टरपंथी मस्तूल की एक तकनीक का वर्णन करता है, जिसका उपयोग कैंसर की प्रगति का अध्ययन करने के लिए माउस से पूरी स्तन ग्रंथि को शल्य चिकित्सा हटाने के लिए किया जाता है।

Protocol

1. मस्तूल

नोट: मास्टेक्टॉमी की टाइमिंग बहुत जरूरी है। यदि यह बहुत जल्दी किया जाता है, तो फेफड़ों का मेटास्टेसिस नहीं होता है। यदि यह बहुत देर से किया जाता है, तो प्राथमिक ट्यूमर ने प्रमुख रक्त वाहिकाओं पर हमला किया है, जो एक पूर्ण ऑन्कोलॉजिक रीसेक्शन को चुनौती देते हैं। इस प्रकार, मस्तूल के लिए कई समय बिंदुओं का परीक्षण किया गया ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि किस समय बिंदु ने रेसेक्शन से पहले मेटास्टेसिस की प्रतीक्षा में उचित संतुलन का उत्पादन किया। 50 से अधिक माउस प्रयोगों में ऐसा करने के बाद, यह प्रदर्शित किया गया था कि कैंसर सेल टीका के बाद 8 दिनों में मस्तूल (या जब ट्यूमर का आकार 5 मिमी तक पहुंचता है) उस संतुलन को प्राप्त करने के लिए आदर्श समय बिंदु था।

  1. 2-4% आइसोफ्लोरेन और 0.2 एल/मिन ऑक्सीजन प्रवाह के साथ एक माउस को एनेस्थेटाइज करें जब तक कि चूहे शांति से सांस लेते हैं (2-3 मिनट) और 0.05 मिलीग्राम/किलोग्राम बुप्रेनोरफिन को अपने कंधे में चमड़े के इंजेक्शन।
  2. प्रयोगशाला टेप का उपयोग कर माउस के अंगों को नियंत्रित करें और कपास झाड़ू का उपयोग करके क्लोरहेक्सीडीन, आयोडीन और 75% इथेनॉल का उपयोग करके अपनी त्वचा को निष्फल करें।
  3. माइक्रोडिसेक्शन कैंची का उपयोग करके, प्रारंभिक कैंसर सेल टीका पर किए गए सर्जिकल निशान से बाईं ओर 5 मिमी त्वचा चीरा 2 मिमी बनाएं। ट्यूमर को हटाने के लिए अग्रभाग की जड़ की ओर चीरा बढ़ाएं, सर्जिकल निशान सहित त्वचा, और ट्यूमर के संपर्क में घाव, साथ ही साथ एक्सिलरी लिम्फ नोड बेसिन जिसमें अधिकांश समय कोई दिखाई देने वाला लिम्फ नोड मास्टेक्टॉमी के समय मौजूद नहीं है। सुनिश्चित करें कि एक्सिलरी नस को नुकसान न पहुंचाए।
  4. "वाई" के आकार में बाँझ 5-0 गैर-अवशोषित टांके का उपयोग करके सिलाई करके त्वचा दोषों को बंद करें।
  5. माउस को एक साफ पिंजरे में लौटाएं और तब तक निगरानी करें जब तक कि वे बरामद न हो जाएं और स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ रहे हों (~ 1-2 मिनट के बाद)। यदि कोई जानवर सर्जरी के 24 घंटे के भीतर अच्छे स्वास्थ्य में दिखाई नहीं देता है, तो बुप्रेनोरफिन (0.2 मिलीग्राम/किलो) का प्रशासन करें।
  6. सर्जरी के 7 दिन बाद संज्ञाहरण के तहत टांके (2-4% आइसोफ्लोरैन और 0.2 एल/मिन ऑक्सीजन प्रवाह के साथ) निकालें।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Micro Dissection Scissors Roboz RS-5983 For cancer cell inoculation and mastectomy
Adson Forceps Roboz RS-5233 For cancer cell inoculation and mastectomy
Needle Holder Roboz RS-7830 For cancer cell inoculation and mastectomy
5-0 silk sutures Look 774B For cancer cell inoculation and mastectomy
Dry sterilant (Germinator 500) Braintree Scientific GER 5287-120V For cancer cell inoculation and mastectomy
Clipper Wahl 9908-717 For cancer cell inoculation and mastectomy

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