Summary

Hemaglütinasyon Testi kullanarak Reaktivite ve Serum Titre Belirlenmesi

Published: January 29, 2010
doi:

Summary

Hemaglütinasyon antikorlar kırmızı kan hücrelerinin bağlamak aglütinasyon şeklidir. Kırmızı kan hücreleri de hazır ve sonuçları çıplak gözle kolayca gözlemlenebilir. Bu video sonuçları yorumlama ve titre belirlenmesi, hemaglutinasyon tayininde yer alan adımları göstermektedir.

Abstract

Hemaglütinasyon aglütinasyon belirli bir biçimi ve antikorlar, bir parçacık antijen olarak hareket kırmızı kan hücreleri, bağladığınızda kullanılır. Kırmızı kan hücreleri, bunlar da hazır olarak özellikle yararlı hedefler ve aglütinasyon çıplak gözle kullanarak gözlemlenebilir. Bu teknik genellikle kan gruplama ve viral kantifikasyon bir antikor titresi (Ab) belirlemek için kullanılır. Bu video, hemaglutinasyon tahlil hazırlanması ve sahne alan adımları spesifik antikorlar kan grubu A-antijenleri, kırmızı kan hücreleri (Revercells) gösterilmiştir. Antiserum, seri Revercells bir süspansiyon eklendi hangi, iyi bir 96 U-alt mikrotitre tepsi seyreltilir. Örnekleri 60 dakika karıştırılır ve daha sonra 37 ° C'de inkübe. Bu süreden sonra, örnekleri daha sonra kolayca Ve + ve orta (-/+) hemaglutinasyon reaksiyonlar için gol olabilir. Bu yaklaşım, basit ve hızlı bir tekniği kullanılarak değerlendirilmiştir bir serum örnek reaktivite ve titresi sağlar. Video testin nasıl değiştirilebilir titre nasıl belirlenir sonuçlar okunur ve nasıl yorumlanır Testin ardındaki teori, ve bu tekniğin kullanımı ile ilişkili herhangi bir sorun kapsayacaktır.

Protocol

5x veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlanması Veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlamak için, üç ayrı çözüm hazırlıklı olması gerekiyor. Distile su 350ml Sodyum barbital NaCl ve 0.94gm 21.25gm çözme çözüm 1 hazırlayın. NaCl ve Sodyum barbital son konsantrasyonları sırasıyla 1.02m ve 13mm. Sıcak distile su 125ml barbital, 1.44gm eriterek çözüm 2 hazırlayın. Barbital son konsantrasyon 62.5mm. Distile su 100 ml CaCl 2 MgCl 2 ve 4.41gm…

Discussion

Hemaglutinasyon testi zaman kısa bir süre içinde değerlendirilmesi gereken çok sayıda serum örneklerinin sağlayan çok basit bir teknik. Uygun olması göz, özel ekipman ihtiyacı olmadan okumak olmanın avantajı da vardır. Bu teknik de bir hemaglutinasyon-inhibisyon testi parçası olarak, idrarda insan koryonik gonadotropin hormonu tespiti için değiştirilmiş olabilir. Standart bir hemaglutinasyon testi ile ilgili olarak, bakım doğru yapılacak tahlil için alınması gereken birkaç alanları vardır….

Acknowledgements

Yazar Miss Lora Matthews sinematografi teknikleri ve Bay Paul Shepherd gerçekleştirmek için teşekkür etmek istiyorum. Bu proje, Güney Avustralya Üniversitesi, Tıp Laboratuarı programı tarafından finanse edildi.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

Play Video

Citar este artículo
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

View Video