Summary

Определение Реакционная способность и титр сыворотки использованием гемагглютинации Пробирной

Published: January 29, 2010
doi:

Summary

Гемагглютинации является одной из форм агглютинации, где антитела связываются с эритроцитами. Красные кровяные клетки являются как легко доступны и результаты легко наблюдаемых использованием невооруженным глазом. Это видео демонстрирует этапы гемагглютинации анализа, интерпретация результатов и определение титра.

Abstract

Гемагглютинации является специфической формой агглютинации и используется, когда антитела связываются с эритроцитами, которые действуют как частицы антигена. Красные кровяные клетки являются особенно полезными целями, поскольку они легко доступны и агглютинация наблюдается использованием невооруженным глазом. Этот метод обычно используется для определения титра антител (Ab), для групп крови и вирусным количественной оценке. В этом видео, этапы подготовки и проведения гемагглютинации анализа является продемонстрировать с помощью антител, специфичных к группе крови-антигенов добавлены в красных кровяных телец (Revercells). Антисыворотки серийно разводят в 96-U-нижний лоток для микротитрования, к которой добавляется суспензия Revercells. Образцы смешиваются, а затем инкубировали при 37 ° С в течение 60 минут. По истечении этого времени образцы могут быть легко забил за В.Е., положительные и промежуточных реакций (-/+) гемагглютинации. Такой подход позволяет реактивности и титр сыворотки, чтобы оценить, используя быстрый и простой метод. Видео будет охватывать Теория, лежащая анализа, как результаты читать и толковать, как титр определяется, как анализ может быть изменен и любые вопросы, связанные с использованием этой техники.

Protocol

Подготовка 5x веронал буферного раствора (VBS) Для подготовки веронал буферного раствора (VBS), три отдельных решения должны быть подготовлены. Подготовка раствора 1, растворяя 21.25gm из NaCl и 0.94gm натрия Barbitone в 350 мл дистиллированной воды. Конечные концентрации NaCl и натрия Barbitone явля?…

Discussion

Гемагглютинации анализа является очень простой метод, который позволяет для большого числа образцов сыворотки крови следует оценивать в течение короткого периода времени. Она также имеет то преимущество, что читать без необходимости специализированного оборудования, с глазу пригод?…

Acknowledgements

Автор хотел бы поблагодарить мисс Лора Мэтьюз для выполнения техники и г-н Пол Пастырь для кинематографа. Этот проект был профинансирован из Университета Южной Австралии, Лабораторная медицина программы.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

Play Video

Citar este artículo
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

View Video