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JoVE Journal Entwicklungsbiologie
Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells Into Pancreatic Beta-Cell Precursors in a 2D Culture System
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Différenciation de cellules souches pluripotentes humaines en précurseurs de cellules bêta pancréatiques dans un système de culture 2D

DOI:
10.3791/63298-v

•

10:12 min

•

December 16, 2021

•

,
1College of Health and Life Sciences,Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation, 2Diabetes Research Center, Qatar Biomedical Research Institute (QBRI),Hamad Bin Khalifa University (HBKU), Qatar Foundation (QF)

Kapitel

  • 00:05Introduction
  • 01:22Induction of Definitive Endoderm Differentiation in Human Pluripotent Stem Cells (hPSCs) (Stage 1)
  • 02:10Immunofluorescence Analysis of hPSC-Derived Definitive Endoderm (Stage 1)
  • 04:19Generation of the Primitive Gut Tube from hPSCs (Stage 2)
  • 05:50Assessment of Differentiation Efficiency of Generating Pancreatic Progenitors
  • 08:10Results: Comparison between Optimized and Non-Optimized Protocol for Scalable Generation of Pancreatic Progenitors from hPSCs
  • 09:21Conclusion

Summary

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Le présent protocole décrit une méthode améliorée pour augmenter la co-expression des facteurs de transcription PDX1 et NKX6.1 chez les progéniteurs pancréatiques dérivés de cellules souches pluripotentes humaines (CSPh) dans des monocouches planes. Ceci est réalisé en reconstituant la matrice fraîche, en manipulant la densité cellulaire et en dissociant les cellules endodermiques.

Tags

Keywords: Human Pluripotent Stem CellsPancreatic Beta-cell Precursors2D Culture SystemCell TherapyDiabetesPancreatic DevelopmentDefinitive EndodermDifferentiationImmunocytochemistryCHIR-99021

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