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Protocolo Baseado em Microdissecção a Laser para a Análise LC-MS/MS do Perfil Proteômico de Grânulos de Neuromelanina
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Protocolo Baseado em Microdissecção a Laser para a Análise LC-MS/MS do Perfil Proteômico de Grânulos de Neuromelanina
1Medizinisches Proteom-Center, Medical Faculty,Ruhr-University Bochum, 2Medical Proteome Analysis, Center for Proteindiagnostics (PRODI),Ruhr-University Bochum, 3Center of Mental Health; Clinic and Policlinic for Psychiatry, Psychosomatics and Psychotherapy,University Hospital Wuerzburg, 4Psychiatry Department of Clinical Research,University of Southern Denmark Odense University Hospital, 5Center of Mental Health, Department of Child and Adolescent Psychiatry, Psychosomatics and Psychotherapy,University Hospital of Wuerzburg, University of Wuerzburg
Kapitel
- 00:05Introduction
- 00:46Laser Microdissection and Pressure Catapulting
- 02:46Sample Preparation for HPLC-MS and Proteomic Raw Data Analysis
- 05:10Statistical Analysis
- 05:50Results: Protein Identification in Neuromelanin Granules (NMGs) and Substantia nigra (SN)
- 07:00Conclusion
Um protocolo robusto é apresentado aqui para isolar grânulos de neuromelanina de tecido humano post-mortem substantia nigra pars compacta via microdissecção a laser. Este protocolo revisado e otimizado minimiza massivamente o tempo necessário para a coleta de amostras, reduz a quantidade de amostra necessária e melhora a identificação e quantificação de proteínas pela análise LC-MS/MS.
