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転写におけるタンパク質とタンパク質の相互作用を研究するための生体層干渉計(BLI)の応用
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Application of Biolayer Interferometry (BLI) for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription
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転写におけるタンパク質とタンパク質の相互作用を研究するための生体層干渉計(BLI)の応用

DOI:
10.3791/59687-v

•

07:18 min

•

July 26, 2019

•

, ,
1Department of Pharmacology, Robert Wood Johnson Medical School,Rutgers University, 2Graduate Program in Physiology and Integrative Biology, School of Graduate Studies,Rutgers University, 3Department of Plant Biology, School of Environmental and Biological,Rutgers University

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:59Biosensor Hydration and Assay Set-Up
  • 02:51Loading of Ligand onto Biosensor and Washing Away Additional Ligand
  • 03:43Association of Analyte to Ligand and Dissociation of Analyte from Ligand
  • 05:41Results: A 28 Amino Acid Middle Region of GrgA Binds σ28 In Vitro
  • 06:45Conclusion

Summary

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RNAポリメラーゼとの転写因子(TF)の相互作用は、通常、プルダウンアッセイを用いて研究される。我々は、クラミジアRNAポリメラーゼとのGrgAの相互作用を特徴付けるためにバイオレイヤー干渉計(BLI)技術を適用する。プルダウンアッセイと比較して、BLIはリアルタイムの関連付けと解離を検出し、より高い感度を提供し、高い定量性を提供します。

Tags

Keywords: Biolayer InterferometryBLIProtein-protein InteractionsTranscriptionKinetic ParametersBiosensorNickel NTAReal-time Association And DissociationQuantitative AnalysisPor Dialysis

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