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Anwendung der Biolayer-Interferometrie (BLI) zur Untersuchung von Protein-Protein-Wechselwirkungen bei der Transkription
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Biochemie
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JoVE Journal Biochemie
Application of Biolayer Interferometry (BLI) for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription
DOI:

07:18 min

July 26, 2019

, ,

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:59Biosensor Hydration and Assay Set-Up
  • 02:51Loading of Ligand onto Biosensor and Washing Away Additional Ligand
  • 03:43Association of Analyte to Ligand and Dissociation of Analyte from Ligand
  • 05:41Results: A 28 Amino Acid Middle Region of GrgA Binds σ28 In Vitro
  • 06:45Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

Wechselwirkungen von Transkriptionsfaktoren (TFs) mit der RNA-Polymerase werden in der Regel mit Pulldown-Assays untersucht. Wir wenden eine Biolayer Interferometry (BLI) Technologie an, um die Wechselwirkung von GrgA mit der Chlamydien-RNA-Polymerase zu charakterisieren. Im Vergleich zu Pulldown-Assays erkennt BLI Echtzeit-Assoziation und Dissoziation, bietet eine höhere Empfindlichkeit und ist sehr quantitativ.

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