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ラパマイシン/mTOR相互作用を研究するための半定量薬物アフィニティ応答性標的安定性(DARTS)アッセイ
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A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction
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ラパマイシン/mTOR相互作用を研究するための半定量薬物アフィニティ応答性標的安定性(DARTS)アッセイ

DOI:
10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

, , , ,
1Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, 2Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

Kapitel

  • 00:04Titel
  • 00:47Collect and Lyse Cells
  • 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
  • 03:28Western Blot Analysis
  • 03:59Results: Rapamycin Inhibition
  • 05:03Conclusion

Summary

Automatische Übersetzung

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本研究では、タンパク質安定性の変化をモニタリングし、タンパク質リガンド相互作用の親和性を推定することにより、DARTS実験のデータ解析能力を強化した。相互作用は、プロテオティック曲線と線量依存曲線の 2 つの曲線にプロットできます。例示的なケースとしてmTOR-ラパマイシン相互作用を用いてきた。

Tags

DARTSDrug Affinity Responsive Target StabilityMTORRapamycinProtein-ligand InteractionProteolytic CurveDose-dependence Curve293T CellsCell LysisBCA AssayPronaseProtease Inhibitor CocktailSDS-PAGE

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