Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca<sup Class='xref'>2+</sup>-imaging and Degranulation Assays

Volodymyr Tsvilovskyy; Alejandra Solis-Lopez; Kathrin &#214;hlenschl&#228;ger; Marc Freichel

doi:10.3791/57222

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Isolamento do peritônio-derivado de mastócitos e sua caracterização funcional com Ca^{2 +}-imagens e ensaios de degranulação

JoVE Journal
Immunologie und Infektion

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JoVE Journal Immunologie und Infektion

Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca²⁺-imaging and Degranulation Assays

Isolamento do peritônio-derivado de mastócitos e sua caracterização funcional com Ca^{2 +}-imagens e ensaios de degranulação

11,947 Views

•

11:31 min

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July 04, 2018

DOI:

10.3791/57222-v

DOI:

10.3791/57222-v

•

11:31 min

July 04, 2018

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7 Views

Volodymyr Tsvilovskyy¹, Alejandra Solis-Lopez¹, Kathrin Öhlenschläger¹, Marc Freichel¹

¹Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Summary

Aqui, apresentamos um protocolo para isolar e cultivar os mastócitos peritoneais murino. Também descrevemos dois protocolos para a sua caracterização funcional: uma imagem fluorescente de enciclopédia Ca^{2 +} concentração intracelular e um ensaio de degranulação baseado na quantificação colorimétrica de β-hexosaminidase a liberado.

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Peritoneum Mast Cells Calcium Imaging Degranulation Intracellular Signaling Excitable Cells Ion Channels Immune Cell Activation Mediator Release Fura-2 RPMI Medium Peritoneal Cavity Cell Suspension IL-3 SCF IgE Receptors

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