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Reprogrammierung primäre Fruchtwasser und Membrane Zellen zur Pluripotenz in Xeno-freien Bedingungen
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1Mitchell Cancer Institute,University of South Alabama, 2College of Medicine,University of South Alabama, 3Institute for Regenerative Medicine,University of Zurich, 4Department of Dermatology,University Hospital Zurich, 5Center for Applied Biotechnology and Molecular Medicine (CABMM),University of Zurich – Irchel Campus
Kapitel
- 00:05Titel
- 00:50Isolation of Primary Mesenchymal Stem Cells from Human Amnion
- 02:31Harvesting Cultured Amniotic Fluid Stem Cells and Amniotic Membrane Stem Cells
- 03:47Transfection with Reprogramming Plasmids
- 05:35Picking Fully Reprogrammed Colonies for Clonial Expansion
- 06:43Clonal Expansion and Maturation of iPSCs
- 07:47Results: Morphological Progression of Cells During Reprogramming
- 08:43Conclusion
Dieses Protokoll beschreibt die Reprogrammierung von primären amniotische Flüssigkeit und Membran mesenchymalen Stammzellen in induzierte pluripotente Stammzellen unter Verwendung eines nicht-Integration von episomal Ansatzes in vollem Umfang chemisch definierten Bedingungen. Verfahren der Gewinnung, Kultur, Neuprogrammierung und Charakterisierung der daraus resultierenden induzierten pluripotenten Stammzellen durch strenge Methoden werden detailliert beschrieben.
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