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Site d'intégration bidirectionnel Retroviral Méthodologie PCR et analyse de données quantitatives Workflow
1UCLA AIDS Institute,University of California at Los Angeles (UCLA), 2Department of Microbiology, Immunology, & Molecular Genetics,University of California at Los Angeles (UCLA), 3Departments of Biomathematics and Mathematics,University of California at Los Angeles (UCLA), 4Personalized Genomic Medicine Research Center, Division of Strategic Research Groups,Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 5Department of Medicine,University of California at Los Angeles (UCLA), 6Department of Veterinary Biosciences, College of Veterinary Medicine,The Ohio State University (OSU)
Kapitel
- 00:05Titel
- 01:11LTR-specific Biotin-primer Extension
- 02:53Rsal and CviQI Digestion and Blunt-ending
- 04:12Straptavidin Bead Binding
- 05:31Linker Ligation
- 06:39Pre-amplification of Both Left and Right Junction DNA
- 08:15Left- and Right-junction-specific Amplifications
- 10:23Results: The IS Bidirectional Assay Improves Detection Rates and Sequence Quantification Accuracy
- 12:09Conclusion
Ce manuscrit décrit la procédure expérimentale et l'analyse de logiciel pour un test de site d'intégration bidirectionnelle qui peut analyser simultanément l'ADN de jonction vecteur-hôte en amont et en aval. Les produits de PCR bidirectionnels peuvent être utilisés pour toute plate-forme de séquençage en aval. Les données résultantes sont utiles pour une comparaison quantitative à haut débit des cibles intégrées d'ADN.
