Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich. Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
Tweerichtings retrovirale integratie site PCR methodologie en kwantitatieve data analyse werkstroom
1UCLA AIDS Institute,University of California at Los Angeles (UCLA), 2Department of Microbiology, Immunology, & Molecular Genetics,University of California at Los Angeles (UCLA), 3Departments of Biomathematics and Mathematics,University of California at Los Angeles (UCLA), 4Personalized Genomic Medicine Research Center, Division of Strategic Research Groups,Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, 5Department of Medicine,University of California at Los Angeles (UCLA), 6Department of Veterinary Biosciences, College of Veterinary Medicine,The Ohio State University (OSU)
Kapitel
- 00:05Titel
- 01:11LTR-specific Biotin-primer Extension
- 02:53Rsal and CviQI Digestion and Blunt-ending
- 04:12Straptavidin Bead Binding
- 05:31Linker Ligation
- 06:39Pre-amplification of Both Left and Right Junction DNA
- 08:15Left- and Right-junction-specific Amplifications
- 10:23Results: The IS Bidirectional Assay Improves Detection Rates and Sequence Quantification Accuracy
- 12:09Conclusion
Dit manuscript beschrijft de experimentele procedure en software analyse voor een bidirectionele integratie site analyse die tegelijkertijd upstream en downstream vector-host junction DNA kan analyseren. Bidirectionele PCR producten kunnen worden gebruikt voor elk downstream sequencing platform. De resulterende gegevens zijn bruikbaar voor een high-throughput, kwantitatieve vergelijking van geïntegreerde DNA-doelen.
