Zum Anzeigen dieser Inhalte ist ein JoVE-Abonnement erforderlich. Melden Sie sich an oder starten Sie Ihre kostenlose Testversion.
Verbesserte Sample Multiplexing von Gewebe mit Combined Precursor Isotopenmarkierung und Isobaric Tagging (cPILOT)
Kapitel
- 00:05Titel
- 01:14Protein Extraction and Generation of Peptides for Chemical-tagging
- 02:05Sample Digestion
- 03:16Dimethylation Labeling (N-termini)
- 05:13Isobaric Tagging (Lys residues)
- 06:12Liquid Chromatography – Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) and MS3
- 07:02Results: cPILOT Can Be Used to Analyze Tissues from an Alzheimer’s Disease Mouse Model and Wild-type Controls
- 08:23Conclusion
Kombinierte Vorläufer Isotopenmarkierung und isobar Tagging (cPILOT) ist eine quantitative Proteomik-Strategie, die Probe Multiplexierungsfähigkeiten von isobar-Tags verbessert. Dieses Protokoll beschreibt die Anwendung von cPILOT an Gewebe von einer Krankheit Mausmodell und Wildtyp-Kontrollen der Alzheimer.
Tags
Enhanced Sample MultiplexingCombined Precursor Isotopic LabelingIsobaric TaggingCPILOTAlzheimer’s DiseaseMouse ModelProtein ChangesAgingNeurodegenerative DiseaseCancerPathogenesisDiagnosisPrognosisTherapeutic TargetsAcetylationProtein NitrationBrainHeartLiverBCA AssayProtein ConcentrationDithiothreitolIodoacetamideL-cysteineTrypsin Digestion
