Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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まず、培養で所望の乳癌細胞株を確立する。手術の前日、マウスの腹部を剃り、脱毛クリームを使用して毛皮を取り除き、うるぎ乳首を露出させます。手術当日、細胞を採取し、マウスを麻酔し、つまみつまみへの応答の欠如を確認する。ピンセットを使用して、乳首の周りの皮膚をつまんで、高揚したトンネルを作成します。
次いで、採取した細胞の注射器を使用して、皮膚を突き刺す。針は、先端が乳首に近づくまでトンネルに従う必要があります。針の先端を乳首のすぐ下の乳腺脂肪パッドにそっと上げます。ピンセットを取り出して針でスキンテントを形成し、ゆっくりと細胞を注入します。
最後に、ニップルを囲む丸いバンプを乱さないで注意して、注射器を引き込みます。注入された細胞およびそれに続く腫瘍はルシファーゼを発現し、生物発光画像を用いて追跡することができる。プロトコル例では、マウスの異形性乳癌の確立を示す。手術の前日に、手動でレシピエントマウスを拘束し、動物の腹側を毛皮に向けて4番目の乳首の周りに剃ります。
脱毛クリームの薄い層で毛皮を拭きます。30〜60秒後にクリームを取り除くために蒸留水を使用しました。そして、柔らかいペーパータオルでマウスを乾燥させます。手術当日、氷上の無菌マイクロ遠心分離管中のPBS濃度の1ミリリットル当たり2 x 10〜5番目の細胞にマウス乳癌細胞懸濁液を希釈する。
各注射の前に、1つの1ミリリットルの注射器を1つに1つずつ、16針ずつ、1つのマウスにつき50マイクロリットルの細胞を搭載する。そして、各鎮静動物のつま先ピンチに対する応答の欠如を確認してください。動物の目に軟膏を塗布し、ピンセットを使用して最初のマウスの4番目の乳首の周りに皮膚をテントに入れ、シリンジが従うトンネルを作ります。
ベベルを上向きにして注射器を持ち、針先が乳首に届きそうになるまでトンネルに続いて、乳首から5〜10ミリリットルで皮下に入ります。- ピンセットを使用して最初の乳首の周りの皮膚をテントに入れるので、注射器が続くトンネルが作られます。針はピンシーツチップの間に入る必要があり、組織に落ち込むのではなく、乗り上げる必要があります。ベベルが乳首の下になるまで、針の先端を慎重に乳腺脂肪パッドに上に移動します。
そして、癌細胞の遅い注入を可能にするために皮膚テントを解放する。- 挿入時に、慎重にベベルが乳首の下に入るまで、ニードルチップを乳腺脂肪パッドに上に移動し、細胞を正しい場所に確実に送達するように抵抗感を感じること。すべての細胞が注入されたら、針を少し横に回し、注射器をゆっくりと引き込みます。綿棒を使用して針の傷口に10〜20秒間圧力をかけ、液体の浸透がないことを確認します。
注入されたニップルは、中央に乳首を持つ透明な白い平らな球として表示されるはずです
