Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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Transcript
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首先,在培养中建立所需的乳腺癌细胞系。手术前一天,剃掉老鼠的腹部,用去皮膏去除毛皮,露出腹腔。在手术当天,收集细胞,麻醉小鼠,并确认对脚趾捏缺乏反应。使用钳子,捏紧周围的皮肤,以创建一个提升的隧道。
然后,用收集的细胞的注射器刺穿皮肤。针头应沿着隧道,直到尖端接近。轻轻地将针尖移到乳腺脂肪垫中,就在下面。取出钳子,用针头形成皮肤帐篷,然后慢慢注射细胞。
最后,收回注射器,注意不要打扰周围的圆形凸起。注射的细胞和随后的肿瘤表达红素酶,可以使用生物发光成像进行跟踪。在示例协议中,我们将显示穆林矫原性乳腺癌的建立。在手术前一天,手动约束接受者鼠标,将动物腹部侧翻到毛皮上,在第四个周围剃光。
用一层薄薄的脱毛霜擦去皮毛。使用蒸馏水在 30 到 60 秒后去除奶油。用柔软的纸巾擦干鼠标。手术当天,将乳癌细胞悬浮稀释到每毫升PBS浓度的2×10至第5个细胞,在冰上无菌的微中量管中。
每次注射前,加载一个,一毫升注射器,配备.45乘16针,每只小鼠50微升细胞。并确认对每只镇静动物的脚趾捏缺乏反应。在动物的眼睛上涂上软膏,并用钳子将第一只老鼠的第四个周围的皮肤帐篷起来,为注射器的跟随创造一条隧道。
将注射器按住,斜面朝上,皮下从向下 5 至 10 毫升进入皮肤,跟随隧道,直到针尖几乎到达。- 使用钳子将第一个周围的皮肤帐篷起来,为注射器创建一个通道。针头应该进入钳子尖之间,应该骑起来,而不是压入组织。小心地将针尖移到乳腺脂肪垫中,直到斜面在下。
并释放皮肤帐篷,让癌细胞缓慢注射。- 插入后,小心地将针尖移到乳腺脂肪垫中,直到斜面在下,并且您感到阻力,以确保将细胞输送到正确的位置。当所有细胞都注射后,将针头稍微转向一侧,慢慢收回注射器。使用棉签对针伤施加压力10至20秒,以确保没有液体渗漏。
注射的应显示为透明的白色扁平球体,位于中心