Hier beschreiben wir die detaillierte Methodik für Stress erhöhter Angst lernen (SEFL), einem präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung bei Ratten und Mäusen Experimente erforderlich. Das Modell nutzt Aspekte der Angst Pawlowsche Konditionierung und als Index der erhöhte Angst bei Nagetieren einfrieren.
Angst Verhaltensweisen sind wichtig für das Überleben, aber unverhältnismäßig hohes Maß an Angst können erhöhen die Anfälligkeit für psychiatrische Erkrankungen wie posttraumatische Belastungsstörung (PTBS) entwickeln. Um die biologischen Mechanismen der Angst Dysregulation bei PTBS zu verstehen, ist es wichtig, mit einer gültigen Tiermodell der Störung zu beginnen. Dieses Protokoll beschreibt die Methodik für Stress erhöhter Angst lernen (SEFL), einem präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung, bei Ratten und Mäusen Experimente erforderlich. SEFL wurde entwickelt, um kritische Aspekte der posttraumatischen Belastungsstörung, einschließlich der langfristigen Sensibilisierung der Angst lernen, verursacht durch eine akute Stressor zu rekapitulieren. SEFL verwendet Aspekte der Pawlowsche Konditionierung Angst sondern erzeugt eine deutliche und robuste sensibilisierten Angstreaktion weit größer als normale bedingte Angst Antworten. Das Trauma-Verfahren beinhaltet ein Nagetier in einer Klimaanlage Kammer platzieren und Verwaltung von 15 unsignaled Schocks nach dem Zufallsprinzip verteilt über 90 Minuten (für Ratte Experimente; für Maus-Experimente, Schocks, die zufällig verteilt über 60 Minuten dienen 10 unsignaled) . Am 2. Tag Nager befinden sich in einem Roman Konditionierung Kontext wo erhalten sie einen einzigen Schlag; dann, am Tag 3 sie sind wieder in demselben Kontext wie am 2. Tag platziert und für Änderungen in der eisigen Ebenen getestet. Nagetiere, die zuvor die Trauma-Anzeige verbessert Ebenen des Einfrierens auf dem Testtag im Vergleich zu denen, die keine Erschütterungen am ersten Tag erhalten. So erzeugt eine einzelne sehr stressige Erlebnis (Trauma) mit diesem Modell extreme Angst vor die Reize, die mit dem traumatischen Ereignis verknüpft.
Angst ist eine kritische Verhalten für das Überleben, denen Einzelpersonen zu erkennen und reagieren auf Bedrohungen. Jedoch können übertriebene Angst Antworten zur Entwicklung von psychiatrischen Erkrankungen wie posttraumatische Belastungsstörung (PTBS). Kennzeichnend für PTBS ist eine übertriebene Reaktion auf milde Stressoren, insbesondere diejenigen, die erinnern an das ursprüngliche Trauma und eine Tendenz zu entwickeln, neue Ängste1,2. Im Labor wird Angst oft gemessen, durch Einfrieren Verhalten, das eine zuverlässige und ethologically gültige Index der Angst vor Menschen und Nagern3,4ist. Es ist bekannt, dass PTBS Dysregulation von Angst und verstärkte Angst Ausdruck betrifft, fehlt robuste Tiermodellen der PTSD, die diese erweiterten Angstreaktion auf eine relativ harmlose Reiz zuverlässig zu erfassen.
Dieses Protokoll bietet die detaillierte Methodik zur Durchführung von Stress erhöhter Angst lernen (SEFL) versuchen, eine zuverlässige und robuste präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung, bei Ratten und Mäusen erforderlich. SEFL nutzt Aspekte der Pawlowsche Angst Konditionierung, aber es unterschiedliche Antworten von normalen Angst Klimaanlage produziert und rekapituliert die verstärkte Angst vor folgender traumatischer Stress bei PTBS Patienten5,6beobachtet. In diesem Modell einzelne sehr stressig (nachfolgend als Trauma) führt zu einem dauerhaften Verhaltensänderungen, einschließlich extreme Angst vor Reize mit dem traumatischen Ereignis verknüpft, erhöhte Angst, Startle Reaktivität erhöht und verändert Glukokortikoid-Signalisierung7,8. Die große Besonderheit des SEFL ist, dass die folgenden Exposition zu einer traumatischen Stressor (eine Serie von unsignaled Schocks) in einem unterschiedlichen Kontext Tiere zeigen eine übertriebene Angstreaktion auf eine milde Stressor (zB., einen einzigen Schlag) in einem anderen Kontext. Wichtig ist, ist die SEFL Wirkung nicht durch die Verallgemeinerung aus dem Trauma-Kontext auf die neuartige Kontext oder erhöhte Schock Empfindlichkeit5. In unserem Modell nutzen wir gezielt Verfahren, die Verallgemeinerung zu einem neuartigen Kontext wie ausgeprägten Verkehr, Geruch und Raster Boden Muster zu reduzieren. Daher im Gegensatz zu normalen Angst Klimaanlage ist SEFL ein nicht-assoziativen Prozess, der zu einer neuen Angst lernen führt, die überproportional im Zusammenhang mit der ökologischen Hinweise, die nicht direkt mit dem traumatischen Erlebnis verbunden. Umfangreiche Arbeit zeigt, dass eine 90-minütige Sitzung mit 15 unvorhersehbaren Schocks in Ratten (oder einer 60-minütigen Sitzung mit 10 unvorhersehbaren Schocks bei Mäusen) eine lang anhaltende Sensibilisierung der Angst Klimaanlage sowie erhöhte Ängstlichkeit induziert und Dysregulation im zirkadianen Rhythmus des basalen Corticosteron. Im Gegensatz dazu vor der Exposition zu einer einzigen fußreiz SEFL9produziert nicht. Darüber hinaus kann SEFL zuverlässig bei Ratten und Mäusen genutzt werden.
Daher ist das SEFL Modell der posttraumatischen Belastungsstörung ein mächtiges Werkzeug zum Sondieren der biologischen Mechanismen PTSD Pathophysiologie beteiligt. Mit SEFL, können Forscher untersuchen wie die Exposition gegenüber einem Trauma Zukunft Angst lernen auswirken kann. Darüber hinaus kann dieses Modell für die Untersuchung von bestimmter zellulärer und molekularer Mechanismen, die bei der Regulierung der verstärkte Angst Ausdruck wie bei PTBS beobachtet beteiligt sein können nützlich sein.
SEFL ist eine robuste Verhaltensmodell von PTSD, die zusammengefaßt werden kann, bei Ratten und Mäusen und kann verwendet werden, um die sensibilisierten Angst-Reaktionen zu studieren, die PTBS charakterisieren. Nach traumatischen Stress zeigen Nagetiere eine erhöhte Angstreaktion in einem unterschiedlichen Kontext erst nach diesem Zusammenhang mit einer milden Stressor gekoppelt ist, die als eine Erinnerung an eine frühere traumatische Erfahrung dient. Nach den traumatischen Stress zeigen Nagetiere wenig überrasche…
The authors have nothing to disclose.
Diese Arbeit wurde vom nationalen Institut der Gesundheit R01AA026530 (MSF), Staglin Center for Brain and Behavioral Health (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1 und NARSAD 26612 (AKR), und NSF DGE-1650604 (SG) finanziert.
Fear Conditioning Chamber for Low Profile Floors | Med Associates Inc. | VFC-008-LP | Fear conditioning chamber |
Sound Attenuating Cubicle | Med Associates Inc. | NIR-022SD | Sound-attentuaing cubicle to prevent intrusion of outside noise |
NIR/White Light Control Box | Med Associates Inc. | NIR-100VR | Light control box capable of delivering white and near-infrared light |
NIR VFC Light Box | Med Associates Inc. | NIR-100L2 | White overhead houselight |
Windex Original Glass Cleaner | Windex | Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals | |
Acetic acid | Fisher Scientific | A38-212 | Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals |
A-Frame Chamber Insert | Med Associates Inc. | ENV-008-IRT | Black Plexiglas triangular insert to differentiate internal layout of Contexts A and B |
Curved Wall Insert | Med Associates Inc. | VFC-008-CWI | White plastic sheet to differentiate internal layout of Contexts A and B |
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Grid Rods for Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A | Flat grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 1/8" & 3/16" Grid Rods Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005-S | Staggered grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Staggered Grid Rods for Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A-L | Alternating grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Grid Rods for Rat | Med Associates Inc. | VFC-005 | Flat grid floor for rats |
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 3/16" & 3/8" Grid Rods | Med Associates Inc. | VFC-005-L | Alternating grid floor for rats |
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Staggered Grid Rods for Rat | Med Associates Inc. | VFC-005-S | Staggered grid floor for rats |
Metal pans | Med Associates Inc. | Metal pans to catch droppings underneath grid floors | |
Standalone Aversive Stimulator/Scrambler | Med Associates Inc. | ENV-414S | Shock generator and scrambler for footshock delivery |
Multimeter | Fluke | 87-5 | Tool for measuring footshock amplitude |
VideoFreeze Software | Med Associates Inc. | SOF-843 | VideoFreeze software for controlling shock delivery |
High Speed Firewire Monochrome Video Camera | Med Associates Inc. | VID-CAM-MONO-4 | Video camera capable of recording in near-infrared light |