هنا يمكننا وصف المنهجية التفصيلية المطلوبة لإجراء تجارب التعلم (سفل) الإجهاد–تعزيز الخوف، نموذج السريرية لاضطراب الإجهاد اللاحق للصدمة النفسية، في كل من الفئران والجرذان. النموذج يستخدم جوانب الخوف Pavlovian تكييف وتجميد كفهرس للخوف المعززة في القوارض.
ويخشى السلوكيات الهامة للبقاء على قيد الحياة، ولكن يمكن أن تزيد من مستويات مرتفعة من الخوف التعرض لوضع الاضطرابات النفسية مثل اضطراب الإجهاد اللاحق للصدمة النفسية (الاضطراب). لفهم الآليات البيولوجية للتقلبات الخوف في تلك الاضطرابات، من المهم أن تبدأ مع نموذج حيوانية صالحة من الاضطراب. ويصف هذا البروتوكول المنهجية اللازمة لإجراء تجارب التعلم (سفل) الإجهاد–تعزيز الخوف، نموذج السريرية للاضطراب، في الفئران والجرذان. ووضعت سفل إيجاز الجوانب الحرجة للاضطراب، بما في ذلك توعية طويلة الأجل للتعلم الخوف الناجم عن الضغوطات حادة. جوانب استخدامات سفل Pavlovian الخوف تكييف ولكن ينتج استجابة متميزة وقوية من خوف وعي أكبر بكثير من الردود الخوف الشرطي العادي. ويشمل الإجراء صدمة من القوارض في دائرة تكييف وإدارة الصدمات أونسيجناليد 15 موزعة بشكل عشوائي أكثر من 90 دقيقة (لإجراء التجارب على الفئران؛ لإجراء التجارب على الماوس، 10 أونسيجناليد وتستخدم الصدمات موزعة بشكل عشوائي أكثر من 60 دقيقة) . في اليوم 2، توضع القوارض في رواية تكييف السياق حيث تلقي صدمة واحدة؛ ثم، في اليوم 3 فهي وضع مرة أخرى في نفس السياق كما في يوم 2 واختبارها للتغييرات في تجميد مستويات. القوارض التي سبق وتلقى عرض الصدمات تعزيز مستويات من تجميد في يوم الاختبار مقارنة بتلك التي تلقي لا صدمات في اليوم الأول. وهكذا، مع هذا النموذج، تنتج تجربة مجهدة للغاية واحدة (الصدمة النفسية) الخوف الشديد من المحفزات المرتبطة بالحدث الأليم.
الخوف سلوك حاسم للبقاء على قيد الحياة، تمكين الأفراد من التعرف على الإخطار والاستجابة. ومع ذلك، يمكن أن تسهم استجابات الخوف مبالغ فيه تطوير الاضطرابات النفسية مثل اضطراب الإجهاد اللاحق للصدمة النفسية (الاضطرابات). إحدى خصائص الاضطراب استجابة مبالغ فيها للضغوطات معتدل، لا سيما تلك التي تذكر بالصدمة الأصلي، وميل إلى وضع مخاوف جديدة1،2. في المختبر، كثيرا ما يقاس الخوف من خلال تجميد السلوك، الذي مؤشر موثوق بها وصالحة اثولوجيكالي من الخوف في البشر والقوارض3،4. في حين أنه معروف أن الاضطراب ينطوي على التقلبات من الخوف والخوف تعزيز التعبير، هناك نقص في نماذج حيوانية قوي الاضطراب التي موثوق بها والتقاط هذا الخوف زيادة استجابة لحافز حميدة نسبيا.
يوفر هذا البروتوكول المنهجية التفصيلية المطلوبة لإجراء تجارب التعلم (سفل) الإجهاد–تعزيز الخوف، نموذجا الإكلينيكية موثوقة وقوية من الاضطراب، في كل من الفئران والجرذان. ويستخدم سفل جوانب Pavlovian تكييف الخوف، لكنها تنتج استجابات متميزة من تكييف الخوف الطبيعي ويجمل الخوف المحسنة التالية الصدمة لوحظت في الاضطراب المرضى5،6. وفي هذا النموذج، تجربة مجهدة للغاية واحدة (يشار إليها هنا كالصدمات) يؤدي إلى دائم التغييرات السلوكية، بما في ذلك الخوف الشديد من المحفزات المرتبطة بالحدث الأليم وازداد القلق وزاد مفاعليه جفل وغيرت جلوكوكورتيكويد يشير إلى7،8. الميزة الرئيسية من سفل هو أنه بعد التعرض للضغوطات صدمة (سلسلة من الصدمات أونسيجناليد) في سياق متميزة، الحيوانات إظهار استجابة خوف مبالغ فيه الضغوطات خفيفة (مثلاً.، صدمة واحدة) في سياق مختلف. الأهم من ذلك، أن تأثير سفل ليس بسبب التعميم من سياق الصدمة إلى سياق الرواية أو صدمة زيادة حساسية5. في نموذجنا، نحن هادف الاستفادة من الإجراءات التي تقلل من أي التعميم إلى سياق رواية مثل نمط الكلمة النقل ورائحة وشبكة متميزة. ولذلك، خلافا لتكييف الخوف العادي، وهو سفل عملية غير قابل للاقتران الذي يؤدي إلى تعلم جديدة في خوف المرتبط غير متناسب بمنبهات بيئية غير مباشرة المرتبطة بتجربة مؤلمة. العمل المكثف الذي يوضح أن دورة 90 دقيقة واحدة تحتوي على 15 الصدمات غير المتوقعة في الفئران (أو دورة 60 دقيقة واحدة تحتوي على 10 الصدمات غير المتوقعة في الفئران) الحث توعية طويلة الأمد لتكييف الخوف جنبا إلى جنب مع زيادة القلق و التقلبات في إيقاع circadian القشري القاعدي. وفي المقابل، ما قبل التعرض لواحد فوتشوك لا تنتج سفل9. وعلاوة على ذلك، يمكن أن تستخدم سفل موثوق في الجرذان والفئران.
ومن ثم فإن هذا النموذج سفل الاضطراب أداة قوية لاستكشاف الآليات البيولوجية التي تشارك في تلك الاضطرابات الفيزيولوجيا المرضية. استخدام سفل، فحص الباحثون كيف يمكن أن تؤثر على التعرض لصدمات التعلم الخوف مستقبلا. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يكون هذا النموذج مفيداً للتحقيق في الآليات الخلوية والجزيئية المحددة التي يمكن أن تشارك في تنظيم التعبير الخوف المعززة كما هو ملاحظ في الاضطراب.
سفل هو نموذج سلوكية قوية من الاضطرابات التي يمكن أن تكون لخص في الجرذان والفئران ويمكن استخدامها لدراسة استجابات الخوف توعية التي تميز اضطراب ما بعد الصدمة. بعد الصدمة، إظهار القوارض استجابة خوف المتزايد في سياق مختلف اختلافاً واضحا إلا بعد ذلك السياق هو يقترن الضغوطات معتدل بمثابة تذكر?…
The authors have nothing to disclose.
تم تمويل هذا العمل من الوطني معهد للصحة R01AA026530 (أطباء بلا حدود)، مركز ستاجلين للدماغ والسلوكية الصحية (أطباء بلا حدود)، والفيدرالية-F32 MH10721201A1 ونارساد 26612 (عكر) وتايين جبهة الخلاص الوطني-1650604 (سان جرمان).
Fear Conditioning Chamber for Low Profile Floors | Med Associates Inc. | VFC-008-LP | Fear conditioning chamber |
Sound Attenuating Cubicle | Med Associates Inc. | NIR-022SD | Sound-attentuaing cubicle to prevent intrusion of outside noise |
NIR/White Light Control Box | Med Associates Inc. | NIR-100VR | Light control box capable of delivering white and near-infrared light |
NIR VFC Light Box | Med Associates Inc. | NIR-100L2 | White overhead houselight |
Windex Original Glass Cleaner | Windex | Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals | |
Acetic acid | Fisher Scientific | A38-212 | Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals |
A-Frame Chamber Insert | Med Associates Inc. | ENV-008-IRT | Black Plexiglas triangular insert to differentiate internal layout of Contexts A and B |
Curved Wall Insert | Med Associates Inc. | VFC-008-CWI | White plastic sheet to differentiate internal layout of Contexts A and B |
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Grid Rods for Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A | Flat grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 1/8" & 3/16" Grid Rods Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005-S | Staggered grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Staggered Grid Rods for Mouse | Med Associates Inc. | VFC-005A-L | Alternating grid floor for mice |
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Grid Rods for Rat | Med Associates Inc. | VFC-005 | Flat grid floor for rats |
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 3/16" & 3/8" Grid Rods | Med Associates Inc. | VFC-005-L | Alternating grid floor for rats |
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Staggered Grid Rods for Rat | Med Associates Inc. | VFC-005-S | Staggered grid floor for rats |
Metal pans | Med Associates Inc. | Metal pans to catch droppings underneath grid floors | |
Standalone Aversive Stimulator/Scrambler | Med Associates Inc. | ENV-414S | Shock generator and scrambler for footshock delivery |
Multimeter | Fluke | 87-5 | Tool for measuring footshock amplitude |
VideoFreeze Software | Med Associates Inc. | SOF-843 | VideoFreeze software for controlling shock delivery |
High Speed Firewire Monochrome Video Camera | Med Associates Inc. | VID-CAM-MONO-4 | Video camera capable of recording in near-infrared light |