Um protocolo para a detecção sensível e quantitativa da atividade da topoisomerase 1 usando o ensaio de detecção de atividade enzimática aprimorada do círculo rolante é descrito. O método permite a detecção da atividade da topoisomerase 1 a partir de componentes purificados ou extratos celulares/teciduais. Este protocolo tem amplas aplicações em qualquer campo que envolva a detecção de atividade enzimática.