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포유류 세포에서 유비퀴틴화된 p53 단백질의 정제
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JoVE 杂志 生物化学
Purification of Ubiquitinated p53 Proteins from Mammalian Cells
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포유류 세포에서 유비퀴틴화된 p53 단백질의 정제

DOI:
10.3791/63602-v

•

10:55 min

•

March 21, 2022

•

, ,
1Center for Translational Medicine,The Affiliated Zhangjiagang Hospital of Soochow University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Plasmid Transfection
  • 02:16Cell Collection
  • 02:52Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
  • 05:01Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
  • 07:49Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
  • 08:29Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
  • 10:22Conclusion

Summary

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프로토콜은 p53 종양 억제 단백질을 예로 사용하여 포유류 세포로부터 유비퀴틴화된 단백질을 정제하는 단계별 방법을 설명합니다. 유비퀴틴화된 p53 단백질은 엄격한 비변성 및 변성 조건 하에서 세포로부터 정제하였다.

Tags

Ubiquitinated P53Protein PurificationMammalian CellsUbiquitinationLiposome TransfectionMG132FLAG Lysis BufferProtease Inhibitor

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