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Ensayo de uracilo-ADN glicosilasa mediante desorción láser asistida por matriz/análisis de espectrometría de masas de tiempo de vuelo
JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Uracil-DNA Glycosylase Assay by Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry Analysis
DOI:

12:19 min

April 22, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:28DNA Glycosylase Assay
  • 04:43Transferring UDG Reaction Products to a Matrix Chip
  • 05:33Setting up the Assay Parameters on the Mass Spectrometer
  • 07:19Mass Spectrometer Operation, Viewing Mass Spectra, and Analyzing the Data
  • 09:03Results: UDG Assay Using MALDI-TOF MS for AP Site Containing Product Analysis
  • 11:01Conclusion

Summary

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Se desarrolló un método no radioisotópico no marcado para evaluar la actividad de la uracilo-ADN glicosilasa utilizando la espectrometría de masas MALDI-TOF para el análisis directo de productos que contienen sitios apurínicos/apirimidínicos. El ensayo demostró ser bastante simple, específico, rápido y fácil de usar para la medición de la GLICosilasa de ADN.

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