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Isolierung und In vitro Kultur von Knochenmark-abgeleiteten Makrophagen für das Studium der NO-Redox-Biologie
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JoVE 杂志 免疫与感染
Isolation and In vitro Culture of Bone Marrow-Derived Macrophages for the Study of NO-Redox Biology
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Isolierung und In vitro Kultur von Knochenmark-abgeleiteten Makrophagen für das Studium der NO-Redox-Biologie

DOI:
10.3791/62834-v

•

06:34 min

•

May 31, 2022

•

, , , , , , , ,
1BHF Centre of Research Excellence, Division of Cardiovascular Medicine, Radcliffe Department of Medicine, John Radcliffe Hospital,University of Oxford, 2Wellcome Centre for Human Genetics,University of Oxford

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:53Isolation of Bone Marrow Cells
  • 02:14Selection, Differentiation, and Stimulation of BMDMs
  • 04:24Results: Comparison of Nitrite and Tetrahydrobiopterin Levels in Media Supplemented with LCM or Recombinant GM-CSF and M-CSF
  • 05:54Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll wurde für die Kultur von Tetrahydrobiopterin (BH4)- und induzierbarer Stickstoffmonoxid-Synthase (iNOS)-defizienten primären murinen Makrophagen etabliert, um die NO-Redox-Biologie zu untersuchen. Die Studie konzentriert sich auf die Verringerung der potenziellen Kontamination von BH4 und anderen Artefakten, die in traditionellen Isolations- und Kulturmethoden gefunden werden, die experimentelle Ergebnisse und die Interpretation der Ergebnisse beeinträchtigen können.

Tags

Bone Marrow-derived MacrophagesINOSBH4Nitric OxideRedox BiologyIn Vitro CultureCell IsolationCell DisaggregationCell FreezingDMEM/F-12 Media

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