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Isolement et culture in vitro de macrophages dérivés de la moelle osseuse pour l’étude de la biologie du NO-Redox
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JoVE 杂志 免疫与感染
Isolation and In vitro Culture of Bone Marrow-Derived Macrophages for the Study of NO-Redox Biology
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Isolement et culture in vitro de macrophages dérivés de la moelle osseuse pour l’étude de la biologie du NO-Redox

DOI:
10.3791/62834-v

•

06:34 min

•

May 31, 2022

•

, , , , , , , ,
1BHF Centre of Research Excellence, Division of Cardiovascular Medicine, Radcliffe Department of Medicine, John Radcliffe Hospital,University of Oxford, 2Wellcome Centre for Human Genetics,University of Oxford

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:53Isolation of Bone Marrow Cells
  • 02:14Selection, Differentiation, and Stimulation of BMDMs
  • 04:24Results: Comparison of Nitrite and Tetrahydrobiopterin Levels in Media Supplemented with LCM or Recombinant GM-CSF and M-CSF
  • 05:54Conclusion

Summary

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Ce protocole a été établi pour cultiver des macrophages murins primaires déficients en tétrahydrobioptérine (BH4) et en oxyde nitrique synthase inductible (iNOS) afin d’étudier la biologie du NO-redox. L’étude se concentre sur la réduction de la contamination potentielle du BH4 et d’autres artefacts trouvés dans les méthodes traditionnelles d’isolement et de culture qui peuvent confondre les résultats expérimentaux et l’interprétation des résultats.

Tags

Bone Marrow-derived MacrophagesINOSBH4Nitric OxideRedox BiologyIn Vitro CultureCell IsolationCell DisaggregationCell FreezingDMEM/F-12 Media

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