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Super-Resolution Imaging to Study Co-Localization of Proteins and Synaptic Markers in Primary Neurons

Imagem de super-resolução para estudar co-localização de proteínas e marcadores sinápticos em neurônios primários

DOI:
10.3791/61434-v

•

14:02 min

•

October 31, 2020

•

, , , , , , , ,
1Department of Molecular Biochemistry and Pharmacology,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS, 2Department of Neuroscience,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS, 3Dulbecco Telethon Institute,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS

Chapters

  • 00:00Introduction
  • 01:04Primary Cultures
  • 01:48Immunofluorescence Staining
  • 03:32SIM Microscopy
  • 04:01Microscope Calibration
  • 07:11Acquisition
  • 09:24Post-production: Image Reconstruction
  • 11:24Colocalization with Profile Analysis
  • 12:05Quantification of Pearson’s and Mander’s
  • 12:27Results
  • 13:16Conclusions

Summary

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Este protocolo mostra como empregar microscopia de super-resolução para estudar a co-localização de proteínas em culturas neuronais primárias.

Tags

Super-resolution ImagingCo-localizationPrimary NeuronsSynaptic MarkersStructured Illumination Microscopy (SIM)Neurodegenerative DisordersHippocampal NeuronsFixationImmunostainingMounting SolutionCoverglass

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