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RiboTag Inmunoprecipitación en las células germinales del ratón macho
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发育生物学
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JoVE 杂志 发育生物学
RiboTag Immunoprecipitation in the Germ Cells of the Male Mouse
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RiboTag Inmunoprecipitación en las células germinales del ratón macho

DOI:
10.3791/60927-v

•

10:00 min

•

March 04, 2020

•

, ,
1Department of Animal Science,Rutgers University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Preparation of Solutions
  • 01:57Preparation of Tissue
  • 02:49Homogenization of Sample
  • 04:03Equilibration of Beads
  • 04:59Preclearing Sample
  • 05:56Incubation of Antibody and Beads
  • 06:29Washing of Beads
  • 07:21RNA Extraction
  • 07:54Results: Negative Controls, Reagents Impact, and a Mutant Model
  • 09:09Conclusion

Summary

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Aquí, describimos la inmunoprecipitación de ribosomas y el ARN asociado de poblaciones selectas de células germinales macho adultas utilizando el sistema RiboTag. La cría estratégica y la cuidadosa inmunoprecipitación dan como resultado resultados limpios y reproducibles que informan sobre el traducto de células germinales y proporcionan información sobre los mecanismos de los fenotipos mutantes.

Tags

RiboTagImmunoprecipitationGerm CellsMale MouseRNA ExtractionHomogenization BufferHigh-salt Wash BufferLysis Buffer

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