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Imunoprecipitação ribotag nas células germinativas do rato macho
JoVE 杂志
发育生物学
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JoVE 杂志 发育生物学
RiboTag Immunoprecipitation in the Germ Cells of the Male Mouse
DOI:

10:00 min

March 04, 2020

, ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Preparation of Solutions
  • 01:57Preparation of Tissue
  • 02:49Homogenization of Sample
  • 04:03Equilibration of Beads
  • 04:59Preclearing Sample
  • 05:56Incubation of Antibody and Beads
  • 06:29Washing of Beads
  • 07:21RNA Extraction
  • 07:54Results: Negative Controls, Reagents Impact, and a Mutant Model
  • 09:09Conclusion

Summary

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Aqui, descrevemos a imunoprecipitação de ribossomos e o RNA associado de populações selecionadas de células de germes de camundongos machos adultos usando o sistema RiboTag. A reprodução estratégica e a imunoprecipitação cuidadosa resultam em resultados limpos e reprodutíveis que informam sobre o traduzo meme das células germinativas e fornecem uma visão dos mecanismos dos fenótipos mutantes.

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